Detecção de anticorpos IGG anti-vírus varicela zoster(WZ) através de desenvolvimento de teste fama(Anticorpo fluorescente para antígeno de membrana) adaptado para citometria de fluxo e da sua comparação com o teste fama tradicional

Abstract

Objetivos: Desenvolver um teste de anticorpo fluorescente para antígeno de membrana (FAMA) para detectar IgG anti-virus varicela-zoster (WZ) modificado para citometria de fluxo e campará-Io com resultados do teste FAMA tradicional de modo cego e independente. Métodos: Fibroblastos humanos infectados pelo Virus Varicela-Zoster (WZ) marcados com anticorpo caprino IgG anti-humano fluoresceína lsotiocianato (FITC) foram avaliados através de citometria de fluxo. Foram testadas 62 amostras de soro armazenadas a -70°C no Laboratório da Universidade de Columbia, Nova lorque. Um subgrupo de 20 destas 62 amostras tinha comprovação como verdadeiros positivos (n=10) e verdadeiros negativos (n=10), outras 3 amostras foram utilizadas como controles e um subgrupo de 39 amostras que haviam sido referidas por terem apresentado resultados de ensaio imunoenzimático ELISA comercial negativo ou indeterminado para imunidade humoral para 0 WZ. Resultados: 0 teste de Friedman mostrou não haver dlferença interteste (p=0,387) nem intrateste (p=0.31) no subgrupo de 20 amostras com resultado conhecido. 0 teste FAMA modificado para citometria de fluxo foi comparável ao teste FAMA tradicianal com uma acurácia de 90.32%. obtida pela curva receiver operating characteristic (ROC) cuja área foi de 0,9125 (IC95%: 0,829-1,00). A senslbilidade do teste modificado em relação ao teste tradicional foi de 95,25%, a especificidade foi de 80%, para uma prevalência de 67,74%. Conclusão: O teste FAMA foi adaptado, padronizado e reproduzido para ser lido através de citometria de fluxo, tendo apresentado boa acurácia em relação ao teste FAMA tradicional, representando um ganho pela sua automatização e diminuição do seu tempo de execução, 0 que poderá facilitar sua reprodução em outros centros.