Análise histomorfométrica do efeito do LLLT do tecido ósseo neoformado por distração osteogênica com ensaios preliminares de fluorescência e difração de raios X

Abstract

Esta pesquisa objetivou avaliar a ação do laser de baixa potência (LLLT) no percentual de osso neoformado, na composição química, na cristalinidade e na estrutura cristalina do sítio da distração osteogênica (DO). Quinze coelhos foram submetidos à DO (protocolo: latência – três dias, ativação – sete dias 0,7mm/d e consolidação – 10 dias). Foi empregado o LLLT de AsGaAl (830 nm, 40 mW) com o seguinte protocolo: dose pontual de 10 J/cm2 diretamente sobre o sítio ósseo submetido à DO, no período de consolidação óssea, respeitando-se intervalos de 48 horas. As amostras foram coletadas no final da consolidação, 10 (seis com LLLT) delas foram analisadas por microscopia óptica, para mensuração do percentual de osso neoformado e seis (três com LLLT, um desses foi excluído por haver união precoce dos fragmentos e outro for ocorrer fratura da peça na dissecação) foram analisadas por fluorescência e difração por raios X, a fim de ter analisada a composição química, a cristalinidade e a estrutura cristalina do sítio da DO. O percentual do osso neoformado foi maior no grupo com LLLT (57,89%) do que no controle (46,75%), p=0,006. A composição química revelou, a partir das razões de Ca e P, uma mineralização maior no grupo com LLLT. Os percentuais de cristalinidade indicaram maiores percentuais cristalinos nos coelhos com LLLT. As amostras indicaram semelhança da estrutura cristalina com as hidroxiapatitas, a partir dos difratogramas obtidos. Concluiu-se que o LLLT apresentou efeito positivo no percentual de osso neoformado, na composição química e na cristalinidade do sítio da DO. Ocorreu regeneração no sítio da DO, comprovada pela identificação da hidroxipatita na estrutura cristalina.

This study evaluated the effect of low level laser therapy (LLLT) on the percentage of new bone formation and on the chemical composition, crystallinity and crystalline structure at the site of distraction osteogenesis (DO). Fifteen rabbits underwent DO (latency: 3 days; activation: 7 days at 0. 7 mm/day; consolidation: 10 days). LLLT was performed with 10 J/cm2 AsGaAI (830 nm, 40 mW) laser irradiations applied directly to the site that underwent DO at 48-hour intervals during bone consolidation. Specimens were collected after consolidation; 10 specimens, 6 of which received LLLT, were analyzed using light microscopy to measure the percentage of new bone formation, and six, 3 of which were treated with LLLT (one excluded due to early fragment union and another due fracture of specimen after dissection) were analyzed using fluorescence and X-ray diffraction to analyze chemical composition, crystallinity and crystalline structure at the DO site.The percentage of new bone formation was greater in the LLLT group (57. 89%) than in the control group (46. 75%) (p=0. 006). The analysis of chemical composition and of Ca and P ratios showed greater mineralization in the LLLT group. Crystallinity percentages were greater in rabbits in the LLLT group. Diffractograms showed that crystalline structures were similar to hydroxyapatite. Results showed that LLLT had a positive effect on the percentage of new bone formation and on the chemical composition and crystallinity of the DO site. The DO site regeneration was confirmed by the detection of hydroxyapatite in the crystalline structure.