La irradiancia, la temperatura y la disponibilidad de nutrientes son tres de los factores más importantes que pueden influir en el crecimiento y en la composición bioquímica de cultivos microalgales. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la irradiancia, la temperatura y la concentración de nutrientes en la tasa de crecimiento, la composición bioquímica y la utilización de nutrientes con la diatomea bentónica Navicula incerta. Se mantuvieron cultivos no axénicos y monoespecíficos de N. incerta por 7 días en sistemas estáticos bajo distintas condiciones experimentales con dos irradiancias (100 y 300 µE m^-2 s^-1), dos temperaturas (20 y 25 °C) y dos concentraciones de nutrientes en el medio de cultivo “f” descrito por Guillard y Ryther (1962), y “2f”. La tasa de crecimiento de N. incerta, no se modificó por efecto de la irradiancia, la temperatura y la concentración de nutrientes. Sin embargo, la fotosíntesis máxima (P_máx) y el punto de saturación lumínica (Ik) fue mayor cuando N. incerta se mantuvo en 100 µE m^-2 s^-1, 25 °C y medio “2f”. El contenido de clorofila a fue modificado por efecto de la irradiancia, la temperatura y el día de cultivo. La irradiancia, la temperatura y los nutrientes en el medio de cultivo no causaron diferencias significativas en el contenido de proteínas, carbohidratos, lípidos y en el perfil de ácidos grasos de N. incerta. Al final del cultivo, la disponibilidad de nitratos disminuyó cerca del 50% y los ortofosfatos fueron totalmente usados al día 7. La diatomea N. incerta puede tolerar variaciones de temperatura (20 a 25 °C), de irradiancia (100 a 300 µE m^-2 s^-1) y nutrientes (medio “f” y “2f”) sin tener importantes cambios en su composición bioquímica y fotosíntesis. Irradiance, temperature, and the availability of nutrients are three of the most important environmental factors that can influence the growth and the biochemical composition in microalgal cultures. The aim of this work was to evaluate the effect of irradiance, temperature, and the concentration of nutrients on the growth rate, biochemical composition, and the use of nutrients on the benthic diatom Navicula incerta. We maintained non-axenic and monospecies cultures of N. incerta for 7 days in batch systems under different experimental conditions at two irradiancies (100 and 300 µE m^-2 s^-1), two temperatures (20 and 25 °C), and two nutrient concentrations in the culture media f, as described by Guillard and Ryther (1962), and 2f. The growth rate of N. incerta was unaffected by irradiance, temperature, and nutrients. However, the maximum photosynthesis (P_max) and the highest saturation point of photosynthesis (Ik) were greater when N. incerta was maintained at 100 µE m^-2 s^-1, 25 °C, and in the “2f” medium. The Pmax and Ik values decrease significantly at higher irradiances. The chlorophyll a content was modified by effect of irradiance, temperature, and culture day. The irradiance, temperature, and nutrients in the culture media caused no significant differences to be obtained for proteins, carbohydrates, lipid percentages, and the fatty acid profiles of N. incerta. At the end of the culture, the availability of nitrates decreased nearly 50% and orthophosphates were totally used up at day 7. The diatom N. incerta can tolerate variations of temperature (20 to 25 °C), irradiance (100 to 300 µE m^-2 s^-1), and nutrients (medium f and 2f) without important modifications in their biochemical composition and photosynthesis.