El género Polianthes nativo de México, está representado por un grupo de especies con un alto potencial ornamental, de distribución restringida, sensible a perturbaciones de su hábitat natural y vulnerable a extinción. Algunas especies como P. platyphylla y P. howardii se encuentran amenazadas, es necesaria su conservación. Con la finalidad de establecer un protocolo para su propagación in vitro, se realizó la desinfección de bulbos con un fungicida-bactericida a base de Captan (1 mg·L-1) y Bactrol (1 mg·L-1) durante 20 min y cloruro de mercurio (HgCl2) al 1% durante 10 min. Los bulbos se colocaron en medio de cultivo MS, fueron evaluados nueve tratamientos con citocininas y auxinas en diferentes concentraciones, se evaluaron tres variables de respuesta (a 65 d del establecimiento): número de brote, tamaño de brote y número de hojas en un diseño factorial completamente al azar. El análisis de datos detectó diferencia estadística significativa (α =0.5) entre los tratamientos. Los resultados indican que la variable número de hoja y tamaño de brote, P. howardii logró una mayor eficacia obteniendo hasta dos hojas y tamaño de brote de 7.53 mm, para número de brotes, P. platyphylla fué más eficiente utilizando el tratamiento con ANA (Ácido naftalenacético) 1.0 mg·L-1, BA (Benciladenina) 3.0 mg·L-1, KIN (Cinetina) 0.5 mg·L-1. Estos resultados demuestran la utilidad del cultivo de tejidos en la propagación de especies silvestres del genero Polianthes como una alternativa de conservación.