La esteatosis hepática se define como una acumulación de triglicéridos en las células hepáticas, posterior a una dieta forzada rica en carbohidratos, y es una condición no patológica en palmípedos. El hígado esteatósico presenta una actividad metabólica mayor. La actividad proteásica en células de hígado de pato con esteatosis fue caracterizada por electroforesis. Tres tipos de homogeneizado (crudo, tratado para metaloproteasa y tratado para catepsina) fueron preparados a partir de ejemplares de hígado de pato, grasos y magros. El objetivo de este estudio fue introducir las técnicas de zimografía mono- y bi-dimensionales para caracterizar el perfil proteolítico presente en células hepáticas con esteatosis, con el fin de demostrar la factibilidad de esta técnica en determinar actividad proteolítica presente en hígado graso de manera semi-cuantitativa. La concentración proteica fue 30% mayor en extractos de hígado graso. Usando caseína como sustrato, la actividad proteolítica determinada a 280 nm fue 25% mayor en extractos de hígado graso. Las pruebas zimográficas empleadas permitieron resultados semicuantitativos, detectándose actividad catepsina y metaloproteasa usando geles de poliacrilamida copolimerizados con gelatina y cuantificados por densitometría. El uso de inhibidores específicos confirmó la identidad de las proteínas bajo estudio. Se determinó una actividad metaloproteasa con Mr ~90 ± 5 kDa y un pI de 5,55 ± 0,01; y una actividad catepsina de 38 ± 2 kDa con un pI de 4,40 ± 0,01. Los resultados confirmaron un aumento de estas actividades proteasas en los extractos de hígado esteatósico. El análisis de proteasas de hígado en patos con régimen de alimentación forzada pudiera elucidar el mecanismo involucrado en el desarrollo de la esteatosis.278-285jwilkesm@uc.edu.veSteatosis, the accumulation of triglycerides in hepatic cells after a rich in carbohydrate force-feeding, is a non pathological condition in palmipeds. The steatotic liver presents an enhanced metabolism. Protease activity in duck liver cells with steatosis was electrophoretically characterized. From exemplars of lean and fatty duck liver, three different homogenates were prepared: a plain homogenate, a metalloprotease extract and a cathepsin extract. The purpose of the study was to introduce a one-dimensional zymography (1DZ) and two-dimensional zymography (2DZ) approach in order to characterize the proteolytic profile present in hepatic cells under steatosis, with the ultimate goal to demonstrate the feasibility of this technique in determining proteolytic activity present in fatty liver in a semiquantitative way. Protein concentration was 30% higher in fatty liver extracts. Employing casein as substrate, proteolytic activity measured at 280 nm was determined to be 25% higher in fatty liver extracts. Zymographic techniques allowed semi-quantitative results, successfully detecting cathepsin- and metalloproteaseactivity using polyacrylamide gels copolymerized with gelatin and quantified by densitometry. The use of inhibitors confirmed the identity of the proteins studied. A metalloprotease activity was determined to have a relative molecular mass (Mr) ~90 ± 5 kDa, with an isoelectric point (pI) of 5.55 ± 0.01, and a cathepsin activity of 38 ± 2 kDa with a pI of 4.40 ± 0.01. The results confirm an increase in these protease activities present in extracts from steatotic livers. The analysis of liver proteases activities in forcefed ducks may elucidate the mechanisms behind steatosis development.