| dc.creator | Dornelles, Eduardo Bortoluzzi | |
| dc.creator | Rijsewijk, Franciscus Antonius Maria | |
| dc.creator | Roehe, Paulo Michel | |
| dc.creator | Simonetti, Amauri Braga | |
| dc.date | 2018-06-27 | |
| dc.identifier | https://seer.ufrgs.br/index.php/ActaScientiaeVeterinariae/article/view/16481 | |
| dc.description | As condições para uma transfecção eficaz pelo método de fosfato de cálcio podem variar substancialmente. Neste estudo foi testado o tipo de cultivo celular mais apropriado para transfecção de DNA de herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5) por esta técnica. Primeiramente foi avaliada a capacidade de multiplicação do BoHV-5 em três diferentes tipos de células. Para isto, a concentração viral foi calculada pelo método de dose infectante para cultivo celular / 50% (TCID 50/mL). O BoHV-5 foi titulado em células de linhagem de rim de macaco verde Africano (VERO), células de linhagem de rim de suíno (PKsC3), células primárias de testículos de terneiro (TT) e células de linhagem de rim de bovino (MDBK). Em células VERO e PKsC3 a concentração viral máxima obtida foi 103,3 TCID50/mL, enquanto que em células MDBK o título foi de 106,8 TCID50/mL, similar ao encontrado para as células TT. Para avaliar a eficácia da transfecção nessas células, foi utilizado DNA plasmideal expressando um gene repórter (EGFP). Os resultados mostraram um valor de 4,5% de células fluorescentes para células TT, de 2,9% para PKsC3, de 0,5% para VERO e de 0,05% para MDBK. Quando células PKsC3 e TT foram transfectadas com 0,5 ?g de DNA purificado de BoHV-5, somente as células TT apresentaram resultado positivo, com duas placas virais por poço. Para investigar a influência da concentração de DNA viral, células TT foram transfectadas com 0,5 ?g e 1 ?g de DNA purificado de BoHV-5, produzindo duas e quatro placas, respectivamente. Nas condições experimentais testadas neste estudo os resultados indicam que as células TT poderiam ser boas candidatas para serem utilizadas para a transfecção de DNA de BoHV-5. | pt-BR |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.publisher | Universidade Federal do Rio Grande do Sul | en-US |
| dc.relation | https://seer.ufrgs.br/index.php/ActaScientiaeVeterinariae/article/view/16481/9685 | |
| dc.rights | Copyright (c) 2018 Eduardo Bortoluzzi Dornelles, Franciscus Antonius Maria Rijsewijk, Paulo Michel Roehe, Amauri Braga Simonetti | pt-BR |
| dc.source | Acta Scientiae Veterinariae; Vol. 38 No. 1 (2010); 31-35 | en-US |
| dc.source | Acta Scientiae Veterinariae; v. 38 n. 1 (2010); 31-35 | pt-BR |
| dc.source | 1679-9216 | |
| dc.subject | BoHV-5 | pt-BR |
| dc.subject | Fosfato de cálcio | pt-BR |
| dc.subject | Transfecção | pt-BR |
| dc.subject | Células de testículo de terneiro | pt-BR |
| dc.title | Transfecção de DNA de BoHV-5 com fosfato de cálcio em diferentes tipos de cultivos celulares | pt-BR |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/article | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion | |
