| dc.contributor | | pt-BR |
| dc.creator | Simionatto, Simone | |
| dc.date | 2018-06-27 | |
| dc.date.accessioned | 2018-11-07T22:05:35Z | |
| dc.date.available | 2018-11-07T22:05:35Z | |
| dc.identifier | https://seer.ufrgs.br/ActaScientiaeVeterinariae/article/view/14851 | |
| dc.identifier | 10.22456/1679-9216.14851 | |
| dc.identifier.uri | http://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/2192929 | |
| dc.description | O vírus da anemia das galinhas (CAV) pode causar imunodepressão em galinhas de todas as idades e doença nos frangos jovens, a qual é caracterizada por severa anemia, atrofia da medula óssea e hemorragias. A doença clínica é rara hoje, porém a forma subclínica é, freqüentemente, encontrada em criações comerciais e resulta num considerável decréscimo do desempenho. O CAV apresenta variabilidade genética, entretanto, em relação às amostras brasileiras do CAV, pouco ou quase nada desta variabilidade é conhecida. O presente trabalho descreve um protocolo de Nested-PCR para a detecção do CAV diretamente de amostras clínicas e analisa filogeneticamente as seqüências nucleotídicas das amostras positivas buscando verificar se a patologia apresentada por estas está relacionada com a variabilidade genética. Para a extração de DNA, o método baseado em tiocianato de guanidina mostrou-se mais eficiente e prático de executar que os demais testados. Foi selecionado um par de primers que amplifica uma região de 664 pb do gene vp1 e outro par que amplifica uma região interna de 539 pb para a realização da Nested-PCR. A especificidade dos primers foi avaliada utilizando amostras de lotes controlados para CAV e 30 diferentes isolados de vírus e bactérias causadoras de doenças em galinhas, as quais não geraram produto de amplificação. A sensibilidade foi determinada a partir de diluições seriadas da vacina comercial para o CAV. A Nested-PCR mostrou ser mais sensível do que a PCR e foi capaz de detectar 0,16 DICC50% da cepa vacinal. Além disso, a Nested-PCR detectou DNA viral em tecidos, soro e cama aviária de lotes com e sem sintomas clínicos. O produto de amplificação de 539 pb do gene vp1 de 44 amostras, provenientes de diferentes Estados produtores de frangos do Brasil, foi seqüenciado e foram encontradas 10 novas seqüências nucleotídicas do CAV. Estas 10 seqüências nucleotídicas foram analisadas filogeneticamente pelo método de distância neighbour joining com 1000 replicações o qual, mostrou que não houve correlação entre a patogenia apresentada nos animais e os grupos genéticos. Estas seqüências nucleotídicas também foram comparadas com 30 cepas de CAV isoladas em outros países e não foi observada correlação entre a distribuição geográfica e a variabilidade genética. Substituições de amino ácidos foram observadas em 9 posições sendo que, 65R substituindo o resíduo Q e 98F substituindo o resíduo Y ainda não haviam sido observadas. Conclui-se que, como técnica de detecção do CAV, o protocolo de Nested-PCR aqui descrito é mais sensível e menos trabalhoso do que o isolamento viral. As amostras Brasileiras de CAV possuem características filogenéticas similares às isoladas em outros países. | pt-BR |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.publisher | Universidade Federal do Rio Grande do Sul | en-US |
| dc.relation | https://seer.ufrgs.br/ActaScientiaeVeterinariae/article/view/14851/8708 | |
| dc.rights | Direitos autorais 2018 Simone Simionatto | pt-BR |
| dc.rights | http://creativecommons.org/licenses/by/4.0 | pt-BR |
| dc.source | Acta Scientiae Veterinariae; v. 33, n. 2 (2005); 243-244 | en-US |
| dc.source | Acta Scientiae Veterinariae; v. 33, n. 2 (2005); 243-244 | pt-BR |
| dc.source | 1679-9216 | |
| dc.subject | Patologia Aviária | pt-BR |
| dc.subject | Vírus da anemia das galinhas (CAV); Patologia aviária; Virologia; Diagnóstico molecular; Nested-PCR; Análise filogenética | pt-BR |
| dc.title | Estabelecimento de um protocolo de Nested-PCR para detecção do vírus da anemia das galinhas e análise filogenética de cepas brasileiras | pt-BR |
| dc.type | Artículos de revistas | |
| dc.type | Artículos de revistas | |
| dc.coverage | | pt-BR |
| dc.coverage | | pt-BR |
| dc.coverage | | pt-BR |
