Introdução: Os trabalhadores da área da saúde apresentam um risco elevado de infectarem-se com o Mycobacterium tuberculosis, principalmente aqueles envolvidos no contato direto com o paciente portador de tuberculose. Objetivos: Avaliar a prevalência de infecção por M. tuberculosis e investigar as características epidemiológicas dos trabalhadores da rede básica de saúde da cidade de Santa Cruz do Sul (RS).Métodos: No mês de outubro de 2009, foram entrevistados 60 trabalhadores da saúde que, posteriormente, foram submetidos ao teste tuberculínico (TT). Foram coletados dados epidemiológicos para a avaliação de características associadas à infecção latente.Resultados: Entre os 60 participantes do estudo, 16 (26,7%) apresentaram TT positivo. A positividade ao TT foi significativamente maior entre os trabalhadores com menor tempo de exposição.Conclusões: A infecção latente por M. tuberculosis entre os trabalhadores foi de 26,7%. Os dados encontrados reforçam a necessidade de implementar medidas para diminuir a exposição ocupacional, isto é, a realização de busca ativa por sintomáticos respiratórios na comunidade e a realização de diagnóstico precoce.