Validação laboratorial e fisiológica de conjunto comercial para a quantificação de corticóides fecais em chimpanzé (Pan troglodytes) e orangotango (Pongo pygmaeus), cativos e submetidos a enriquecimentos ambientais

Abstract

Neste trabalho foi realizado estudo comparativo dos níveis de corticóides fecais (CF) de chimpanzé (Pan troglo4Jtes) e orangotango (pongo pygmaeus). Foram analisadas amostras coletadas em duas fases distintas, relacionadas com a introdução de técnicas de enriquecimento ambiental, a saber: Base (antes da introdução) e Habituação (imediatamente após). Realizamos as validações do conjunto comercial para radioimunoensaio ImmunuChem TM Double Antibody Corticosterone da MP Biomedicals, para mensuração de CE A validação laboratorial dos conjuntos diagnósticos para uso em extrato fecal de primatas foi realizada pelo método de paralelismo, no qual, para cada espécie, concentrações conhecidas de corticosterona foram adicionadas a um pool de extratos fecais, sendo estas amostras analisadas em seguida. As inclinações das curvas obtidas nestes ensaios e da curva padrão do ensaio foram então comparadas. Os resultados obtidos para chimpanzé e orangotango, foram respectivamente, Y= 17,23+1,31*X;R"'2=0,98 e Y=11,14+1,29*X; R,",2=0,99. Para a validação fisiológica, foi utilizada a introdução de técnicas de enriquecimento ambiental como causador de aumento dos níveis de CF, conseqüentes à indução de resposta do tipo estresse. Os resultados foram expressos em médias e erros-padrão da média. As concentrações médias destes corticóides foram: chimpanzés: Base (5,90 + / -2,41x103 ng/ g de fezes), Habituação (14,92 + / - 4,66x103ng/ g de fezes) e para o orangotango: Base (91,1 + / - 30,Ox103 ng/ g de fezes), Habituação (185,1 + / - 57x103ng/ g de fezes). Houve diferença significativa (P<0,05) para os valores destes CF para ambas as espécies entre as duas fases estudadas

A comparative study of fecal corticoids (PC) concentrations was carried out with chimpanzees (Pan troglo4Jtes) e orangutans (pongo pygmaeus). Fecal sampIes were collected before (Basal) and just after (Habituation) enrichment introduction and analyzed. We performed biochemical and physiological validations of the ImmunuChem TM Double Antibody Corticosterone kit for radioimmunoassay from MP Biomedicals for quantifYing FC concentrations. To establish the biochemical validity of our assaywe perfo=ed parallelism assays in which pooled fecal extracts from both species were spiked with known quantities of corticosterone standard and the slopes of the curves obtained with these sampIes and the standard curves of the kits were compared. The correlation coefficients were R'2=0.98 (Y= 17.23+1.31 *X) for chimpanzees and R'2=0.99 (Y=11.14+1.29*X) for orangutans. For biological validation, we used the introduction of environmental enrichment to trigger a rise in FC Ievels as a consequence of the response to a stressor. Concentrations were expressed as mean and SEM. Mean concentrations of fecal corticosteroids were: Basal: 5.90:t 2.41 xl03 ng/goffeces, Habituation: 14.92:t 4.66 xl 03 ng/ g of feces for chimpanzees and Basal: 91.1 :t 30.0 xl03 ng/g of feces, Habituation: 185.1 :t 57 x103 ng/g of feces for orangutans. For both species, the mean concentrations of Basal and Habituation periods were significantly different