Os liquens são organismos simbiontes cosmopolitas, altamente adaptáveis. São amplamente mencionados na literatura devido às suas numerosas propriedades biológicas como antimicrobiana, anti-inflamatória, cicatrizante, antineoplásica dentre outras. O objetivo desse estudo foi avaliar a atividade citotóxica in vitro dos estratos orgânicos de Ramalina usnea, os mesmos foram obtidos por meio de esgotamento em aparelho de Sohxlet à 40º C por uma hora, com os solventes, éter, clorofórmio e acetona. Depois de evaporar os solventes em rotaevaporador, os extratos foram acondicionados em dessecador até obter um peso constante, sendo posteriormente calculados os rendimentos. A análise da composição fenólica foi realizada análise cromatográfica de camada delgada (CCD). O ensaio de citotoxicidade foi realizado pelo método do brometo de 3-[4,5-dimetiltiazol-2,5-difeniltetrazólio (MTT). Foi avaliado o efeito antiproliferativo do extrato da Ramalina usnea frente às linhagens de células ascíticas dos tumores experimentais Sarcoma 180 e Carcinoma de Ehrlich. Os resultados de CCD evidenciaram a presença de ácido divaricático (Rf. 0,6) no extrato etéreo e sequicáico (Rf. 0,47) nos extratos acetônico e clorofórmico, além de compostos não identificados (Rfs 0,32 e 0,54) respectivamente. O efeito citotóxico dos extratos orgânicos demonstrou que o extrato etéreo apresentou melhor atividade, com inibição de 42,15% frente à linhagem celular sarcoma 180 e 56,30% frente ao carcinoma de ehrlich na concentração de 200μg/mL Os extratos clorofórmico e acetônico apresentaram baixa atividade. Uma vez que o ácido divaricático é o principal componente do extrato etéreo sugere-se que este composto é o princípio ativo da espécie estudada.