| dc.contributor | CARVALHO JÚNIOR, Luiz Bezerra de | |
| dc.creator | MOURA, Rosemery Batista de | |
| dc.date | 2015-04-08T12:27:25Z | |
| dc.date | 2015-04-08T12:27:25Z | |
| dc.date | 2012-01-31 | |
| dc.identifier | https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/12715 | |
| dc.description | Hemoderivados são medicamentos produzidos pelo fracionamento industrial do plasma
humano. O principal método para purificação de proteínas plasmáticas humanas é baseado
no método de precipitação com etanol desenvolvido por Cohn-Oncley. O uso de
metodologias simples, de baixo custo e eficientes constitui um avanço tecnológico para
obtenção desses hemoderivados. O objetivo deste trabalho foi imobilizar heparina
comercial em Sephadex G-25 revestido com polianilina e posteriormente utilizar o
derivado imobilizado como matriz de afinidade para purificação de proteínas do plasma
humano. Para síntese do derivado imobilizado, Sephadex G-25 foi revestido com
polianilina e tratado com glutaraldeído, em seguida, incubado com solução de heparina
ativada com 1-etil-3-(dimetilaminopropil) carbodiimida e N-hidroxisuccinimida. A fim de
determinar a influencia de variáveis na imobilização de heparina em Sephadex-polianilina,
foi realizado planejamento experimental fatorial fracionário (24-1) no qual se avaliou quatro
variáveis independentes: concentração e tempo de reação do glutaraldeído e concentração e
tempo de reação da heparina. Nas condições otimizadas desses níveis, a heparina
imobilizada em Sephadex-polianilina foi utilizada para purificação de proteínas do plasma
humano. As variáveis concentração de glutaraldeído e concentração de heparina foram
estatisticamente significativas na imobilização de heparina ao Sephadex-PANI e foi obtido
melhor rendimento de heparina imobilizada (6,88 μg mg-1 suporte, equivalente a 45,9% da
heparina ofertada) nas condições 1% (v v-1) de glutaraldeído, 1,5 h de reação com
glutaraldeído, 1,5 mg mL-1 de concentração de heparina e 2 h de reação com heparina.
Nessas condições obteve-se uma quantidade de proteínas plasmáticas de 25,02 – 27,06 μg
mL-1, nos eluatos de NaCl 0,5 a 2,0 mol L-1. A presença de proteínas foi confirmada
através da técnica eletroforética em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). O compósito
sephadex-polianilina-heparina foi eficiente para purificação de proteínas do plasma,
podendo ser usado como teste a antitrombina. | |
| dc.description | CNPq | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.publisher | Universidade Federal de Pernambuco | |
| dc.rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil | |
| dc.rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil | |
| dc.rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/ | |
| dc.rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/ | |
| dc.subject | Sephadex | |
| dc.subject | Polianilina | |
| dc.subject | Heparina | |
| dc.subject | Imobilização | |
| dc.subject | Proteínas plasmáticas | |
| dc.subject | Purificação | |
| dc.title | Purificação de proteínas plasmáticas empregando compósito de Sephadex-polianilina-heparina | |
| dc.type | masterThesis | |
