| dc.contributor | FREITAS, Antonio Carlos de | |
| dc.creator | JESUS, André Luiz Santos de | |
| dc.date | 2014-06-12T18:04:15Z | |
| dc.date | 2014-06-12T18:04:15Z | |
| dc.date | 2008-01-31 | |
| dc.identifier | Luiz Santos de Jesus, André; Carlos de Freitas, Antonio. Produção da proteína L1 do Papilomavírus bovino tipo 1 em Pichia pastoris. 2008. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Genética, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2008. | |
| dc.identifier | https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/6322 | |
| dc.description | Os papilomavírus são conhecidos por causarem lesões tumorais, geralmente benignas, em
tecidos epiteliais de diversos organismos, que podem sob condições adequadas progredirem
para o câncer. O papilomavírus bovino (BPV) tem sido amplamente caracterizado tanto por
ser considerado um modelo experimental para o estudo do papilomavírus humano (HPV),
quanto por sua grande importância na bovinocultura. Estudos para o combate da infecção
mostram que vacinas baseadas em virus-like particles (VLPs), formadas a partir das proteínas
capsidiais L1/L2 ou L1, induzem à produção de anticorpos neutralizantes conferindo proteção
contra o mesmo tipo viral. A levedura Pichia pastoris é um sistema de expressão eficiente e
de baixo custo para produção de altos níveis de proteínas, além de apresentar vantagens em
relação a outros sistemas. Neste trabalho foi avaliado a possibilidade do uso do sistema de
expressão heteróloga baseado em células da levedura P. pastoris para a produção da proteína
L1 do capsídeo do papilomavírus bovino tipo 1. O gene L1 foi amplificado por PCR a partir
do genoma completo de BPV 1, clonado no vetor pGEM-T Easy e subclonado sob a
regulação do promotor AOX1 e em fase de leitura com uma cauda de poli-histidina presentes
no vetor pPICZA. As células da levedura foram transformadas com a construção
pPICZAL1B1 e os recombinantes resistentes a zeocina foram selecionados para expressão da
proteína L1. Estes foram cultivados em frascos contendo meio com glicerol como fonte de
carbono e após 48 horas o meio foi trocado por outro contendo 0,5% de metanol. A cada 24
horas foi adicionado metanol para uma concentração final de 2%, até completar 96 horas. Os
resultados obtidos mostraram que os recombinantes P. pastoris transformados com o cassete
de expressão pPICZAL1B1, após indução com metanol, foram capazes de expressar o gene
L1 e de produzir a proteína L1 de BPV 1. Tais transformantes permitirão o estabelecimento
de um sistema de expressão da proteína L1 e conseqüente produção de VLPs como primeiro
passo para implementação de uma estratégia vacinal contra infecções por papilomavírus | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.publisher | Universidade Federal de Pernambuco | |
| dc.subject | BPV | |
| dc.subject | Papilomavírus Bovino | |
| dc.subject | Pichia pastoris | |
| dc.subject | Sistema de expressão
heterólogo | |
| dc.title | Produção da proteína L1 do Papilomavírus bovino tipo 1 em Pichia pastoris | |
| dc.type | masterThesis | |
