| dc.identifier | Emmanuelle de Farias Rotondano, Tereza; Maria Paiva de Almeida, Alzira. Avaliação de diferentes fontes de DNA para a realização de nested PCR no diagnóstico de erliquiose canina. 2010. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2010. | |
| dc.description | A erliquiose é uma hemoparasitose distribuída mundialmente causada, geralmente, pela
proteobactéria intracelular, Ehrlichia. spp, que infecta leucócitos e plaquetas, formando corpúsculos
de inclusão denominados de mórulas. A identificação das inclusões em exame direto de esfregaço
sanguíneo tem baixa sensibilidade diagnóstica devido ao pequeno número de células parasitadas. O
sangue é a principal fonte de DNA utilizada para a reação em cadeia pela polimerase (PCR), não
havendo avaliação da eficiência de frações celulares sanguíneas no diagnóstico apesar do patógeno
infectar mais de um tipo celular. Desta forma, este trabalho teve como objetivo determinar a
eficiência do sangue e de suas frações como fonte de DNA para a nested PCR (nPCR), além de
indicar a frequência dos agentes etiológicos implicados na erliquiose canina em duas localidades da
região Nordeste do Brasil. A amostra de 22 cães com sintomatologia clínica sugestiva de erliquiose
foi proveniente da rotina médica dos Hospitais Veterinários da Universidade Federal Rural de
Pernambuco (UFRPE), da Universidade Federal de Campina Grande (UFCG) e do Centro Médico
Dr. Leonardo Torres, localizados nos municípios de Recife (PE) e Patos (PB). O DNA foi extraído
de sangue total (ST), mononucleares (M), granulócitos, papa leucocitária (PL) e coágulo sanguíneo
(CS). Na pesquisa direta de hematozoários, 36,4% apresentavam mórulas sugestivas de E. spp. Pela
nPCR, a ocorrência foi de 46,6% (7/15) para E. canis e de 6,6% (1/15) A. platys. Co-infecção com
A. platys e E. canis foi evidenciada em um animal. DNA do patógeno foi amplificado em 71,4%
(15/21) das amostras de sangue total, 1,78% (3/19) de granulócitos, 31,57% (6/19) de
mononucleares e 30% (6/20) de papa leucocitária. A nPCR das amostras de ST não apresentou
diferença estatisticamente significativa (p<0,05) quando comparada com as amostras de M, PL,G e
CS, indicando ser o ST a melhor fonte de DNA para a identificação de Ehrlichia. Vale salientar que
essa é a primeira evidência molecular do envolvimento de A. platys em infecção em cães no Estado
da Paraíba | |
