| dc.contributor | Maria Guedes Paiva, Patrícia | |
| dc.creator | Cleriane Pereira Rabêlo, Clébia | |
| dc.date | 2014-06-12T15:53:23Z | |
| dc.date | 2014-06-12T15:53:23Z | |
| dc.date | 2005 | |
| dc.identifier | Cleriane Pereira Rabêlo, Clébia; Maria Guedes Paiva, Patrícia. Isolamento e caracterização parcial de lectinas em sementes de Capparis yco. 2005. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2005. | |
| dc.identifier | https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1946 | |
| dc.description | Purificação de formas moleculares múltiplas da lectina de sementes de
Capparis yco (CySeL) foi desenvolvida através de fracionamento com sulfato de
amônio e cromatografia das frações (F) em CM-Celulose. O protocolo foi efetivo
para obter, a partir das F20-40 e F40-80, CySeL1 (12 mg) e CySeL2 (9 mg),
respectivamente; adicionalmente revelou diferenças nas propriedades de cargas das
isoformas. Cromatografia em coluna de Hitrap SP, não foi eficiente na separação das
isoformas. CySeL1 e CySeL2 foram inespecíficas para eritrócitos humanos e elevadas
atividades hemaglutinantes específicas (AHE) foram detectadas com células de
coelho. AH de CySeL1 foi inibida com monossacarídeos e glicoproteínas, enquanto
CySeL2 reconheceu somente glicoproteínas. Cromatografia de afinidade em coluna
de fetuína-agarose mostrou que a AH da F20-40 foi mais retida do que a AH da F40-
80. O valor de pH e a presença de íons interferiram diferentemente na AH das
isoformas; somente CySeL2 permaneceu ativa em pH 10 e foi estimulada por 40 mM
de Ca2+ e Mg2+. CySeL1 e CySeL2 apresentaram o mesmo padrão eletroforético. Em
PAGE sob condições nativas, três bandas protéicas que foram extraídas do gel
mostraram AH; SDS-PAGE na presença de β-mercaptoetanol revelou dois
polipeptídeos de Mr 15 e 14 kDa. Coloração do gel para carboidratos mostrou a
natureza glicoprotéica da subunidade de 14 kDa. Quantidades miligramas de
isoformas da lectina de sementes de C. yco foram obtidas. As diferenças estruturais
de CySeL1 e CySeL2 detectadas na cromatografia em CM-Celulose, inibição da AH
com monossacarídeos e efeito do pH e ions na AH associado ao elevado rendimento da purificação das proteínas, indicam a potencial utilização de CySeL1 e CySeL2 em
investigações estruturais e de aplicação biotecnológica. | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.publisher | Universidade Federal de Pernambuco | |
| dc.subject | Lectinas | |
| dc.subject | Capparis yco | |
| dc.subject | Caracterização molecular | |
| dc.title | Isolamento e caracterização parcial de lectinas em sementes de Capparis yco | |
| dc.type | masterThesis | |
