| dc.contributor | Cassandra Breitenbach Barroso Coelho, Luana | |
| dc.creator | Johannes Haver, Nicolaas | |
| dc.date | 2014-06-12T15:52:08Z | |
| dc.date | 2014-06-12T15:52:08Z | |
| dc.date | 2002 | |
| dc.identifier | Johannes Haver, Nicolaas; Cassandra Breitenbach Barroso Coelho, Luana. Desenvolvimento, purificação e caractrização de igG anti lectina de folha de Bauhinia monandra. 2002. Tese (Doutorado). Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2002. | |
| dc.identifier | https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1743 | |
| dc.description | A lectina de folhas de Bauhinia monandra (BmoLL) foi previamente purificada por
fracionamento com sulfato de amônio (F 0-60%) seguido por cromatografia de afinidade
com gel de Guar. Para o estudo da BmoLL foi desenvolvido um anticorpo policlonal em
coelho contra esta lectina; anti-BmoLL IgG foi purificada em coluna de Sepharose-Proteína
A. Em imunodifusão, anti-BmoLL IgG apresentou reações cruzadas com lectinas de
Bauhinia purpurea e Ulex europaeus I. Lectinas de Bandeiraea simplicilofia II e Triticum
vulgaris reagiram inespecificamente com substâncias presentes no antissoro mas ausentes
na preparação obtida de IgG. Precipitações de anti-BmoLL IgG com extratos de outros
tecidos de B. monandra, revelaram outras formas moleculares da lectina. Anti-BmoLL IgG
foi conjugada com peroxidase e aplicada em ELISA, confirmando os resultados de
imunodifusão. Para a sua aplicação no biossensor piezoelétrico, o rendimento do método de
imobilização foi testado imobilizando anti-BmoLL IgG em placas de ouro (4 x 4 x 0.5
mm3) em quantidades de 0, 110 e 220 mg em 100 ml utilizando dextrana tratado com
bromocianeto. As concentrações de IgG não imobilizada foram medidas pela quantificação
de proteína após a imobilização e lavagens com PBS. As quantidades de 110 e 220 mg de
anti-BmoLL IgG apresentaram respectivamente, rendimentos de imobilização de 46% e
33%. Anti-BmoLL IgG (110 mg/ml) foi imobilizada na superfície de ouro de Microbalança
de Cristal de Quartzo (do inglês Quartz Crystal Microbalance, QCM). Na execução de
ensaio de piezoelétrico, a QCM foi incubada com solução de BmoLL (91 mg/ml) seguido
de uma redução de freqüência com 5 kHz, mostrando um grande reconhecimento da lectina
pela IgG imobilizada. No potenciometro e no medidor de turbidez, anti-BmoLL IgG não
provocou nenhuma alteração na ligação de galactose por BmoLL, indicando que a IgG
purificada não tem afinidade pelos sítios de ligação de carboidrato de BmoLL | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | por | |
| dc.publisher | Universidade Federal de Pernambuco | |
| dc.subject | Bauhinia monandra | |
| dc.subject | Lectina de folha | |
| dc.subject | Purificação de IgG | |
| dc.subject | Propriedades eletroquímicas | |
| dc.title | Desenvolvimento, purificação e caractrização de igG anti lectina de folha de Bauhinia monandra | |
| dc.type | doctoralThesis | |
