| dc.identifier | Lucena de Vasconcelos, Taysa; Daniel Pérez, Carlos. Purificação e caracterização bioquímica e farmacológica das proteínas presentes no muco do zoantídeo Palythoa caribaeorum (Cnidaria, Anthozoa). 2011. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2011. | |
| dc.description | Palythoa caribaeorum é um cnidário colonial, abundante no litoral pernambucano.
Durante a maré baixa produz um muco que protege contra a dessecação. Embora
seja conhecida a composição básica deste muco, nenhuma proteína até hoje foi
isolada e caracterizada. Desta forma, este trabalho se propôs a desenvolver uma
metodologia de processamento e purificação que permitisse a obtenção de uma
amostra com relevante conteúdo protéico, baixa viscosidade e alta solubilidade, a
qual fosse possível a sua aplicação em colunas cromatográficas comerciais, além de
testar atividade farmacológica. Para isto, amostras foram coletadas nos meses de
Março/09, Janeiro e Maio/10 na praia de Porto de Galinhas-PE. Mar/09 e Jan/10
foram submetidas à homogeneização mecânica enquanto Mai/10 passou por uma
liquidificação. Após centrifugação, o sobrenadante de Jan/10 (Jan/10B) passou por
uma diluição nas proporções 1/6 e 1/12. Mai/10 foi submetido à diluição 1/3 logo
após liquidificação. Jan/10B e Jan/101/12 passaram ainda por tratamento químico
com uréia 6M e ácido acético 1%, e éter/etanol e clorofórmio/metanol,
respectivamente. Por último, alíquotas de Mar/09B, Jan/10B e Mai/101/3, foram
submetidas à precipitação protéica com sulfato de amônio. As frações obtidas em
todos os procedimentos foram dialisadas. Em seguida, foram realizadas dosagem
protéica, atividade hemaglutinante, eletroforeses, cromatografias, além de inibição
das atividades hemaglutinante e hemorrágica. Os resultados mostraram que a
metodologia mais eficaz na preparação da amostra foi a liquidificação seguida de
diluição 1/3 e precipitação protéica em faixas curtas de concentração de sal. A partir
da fração F3-Mai/101/3, obtida por esta metodologia, uma lectina de 34 KDa (PcmL-
1) foi parcialmente purificada, através de uma cromatografia de afinidade em coluna
Con A Sepharose 4B, seguida de cromatografia de troca aniônica em coluna
Resource Q. Além disso, o muco de P. caribaeorum mostrou ser uma fonte
importante de lectinas xilose e lactose-específicas, e possíveis inibidores de
proteases | |
