masterThesis
Gene de patogenicidade cap20 em isolados de Colletotrichum gloeosporioides
Registro en:
Barreto Maciel, Danielli; Tinti de Oliveira, Neiva. Gene de patogenicidade cap20 em isolados de Colletotrichum gloeosporioides. 2008. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Biologia de Fungos, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2008.
Autor
MACIEL, Danielli Barreto
Institución
Resumen
O primeiro evento para a penetração em algumas espécies de Colletotrichum, inicia com a
adesão do conídio e germinação na superfície da planta hospedeira, produzindo tubo
germinativo e então formando o apressório, que penetra diretamente na cutícula. Estudos
anteriores têm identificado em Colletotrichum gloeosporioides, genes denominados cap,
que são unicamente expressos durante a formação do apressório depois de 4 horas de
exposição do conídio à presença da cera da cutícula do abacate (Persea gratissima). O
objetivo deste trabalho foi amplificar o gene da patogenicidade cap20 e analisar a variação
deste gene intraespecificamente em isolados de C. gloeosporioides provenientes de
diferentes hospedeiros. A variabilidade genética foi acessada usando marcadores de RFLPITS
e intron (primer EI1) e pelo método de agrupamento UPGMA. Primers para o gene
cap20 foram construídos a partir de seqüências selecionadas do GenBank (National Center
of Biotechnology Information, http://www.ncbi.nlm.nih.gov) utilizando o programa Primer
3. A análise dos dendrogramas revelou que o marcador RFLP-ITS foi capaz de separar as
espécies C. gloeosporioides, C. acutatum e C. sublineolum. Em outra mão, esses resultados
também mostraram que o primer EI1 de Intron Splice Site evidenciou maior variabilidade
genética que o RFLP-ITS, porém não separou as espécies. Os primers construídos
nomeados P1 e P2 para o gene cap20 foram eficientes para amplificar C. gloeosporioides
(exceto para cinco isolados de manga e um isolado de pimentão), C. boninense, C.
dematium, C. capsici e C.gossypii var. cephalosporioides, mas não houve amplificação
para C. graminicola, C. acutatum, C. sublineolum e C. coccodes, indicando que este gene
pode apresentar diferenças na estrutura entre os isolados de C. gloeosporioides relacionada
ao hospedeiro e que este gene também está presente nas outras espécies citadas de
Colletotrichum. A digestão com a enzima MspI para os isolados de C. gloeosporioides que
apresentaram amplificação não evidenciou diferenças na estrutura do gene cap20 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior