O papel de Coup-TFII na aquisição de destinos celulares durante a diferenciação de células-tronco embrinoárias = The role of Coup-TFII in the acquisition of cellular fates during the differentiation of embryonic stem cells
The role of Coup-TFII in the acquisition of cellular fates during the differentiation of embryonic stem cells
| dc.creator | Araujo, Amanda Gomes Ferreira, 1992- | |
| dc.date | 2017 | |
| dc.date | 2017-05-05T00:00:00Z | |
| dc.date | 2018-02-02T13:33:38Z | |
| dc.date | 2018-02-02T13:33:38Z | |
| dc.date.accessioned | 2018-03-29T06:16:18Z | |
| dc.date.available | 2018-03-29T06:16:18Z | |
| dc.identifier | ARAUJO, Amanda Gomes Ferreira. O papel de Coup-TFII na aquisição de destinos celulares durante a diferenciação de células-tronco embrinoárias = The role of Coup-TFII in the acquisition of cellular fates during the differentiation of embryonic stem cells. 2017. 1 recurso online (108 p.). Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Artes, Campinas, SP. | |
| dc.identifier | http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/330754 | |
| dc.identifier.uri | http://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/1368357 | |
| dc.description | Orientador: Henrique Marques Barbosa de Souza | |
| dc.description | Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Artes | |
| dc.description | Resumo: Células-tronco embrionárias (CTE) têm ganhado grande destaque em pesquisas por serem o principal modelo in vitro para o estudo do desenvolvimento embrionário, da diferenciação de linhagens celulares específicas e da reprogramação de células somáticas em células pluripotentes induzidas iPS para o uso em terapia celular. Por serem capazes de auto-renovação e pluripotência, CTE têm sido amplamente utilizadas para o estudo do balanço entre o estado indiferenciado (pluripotente) destas células, e a determinação de destinos celulares específicos in vitro. O fator de transcrição Coup-TFII (Chicken Ovalbumin Upstream Promoter-transcription Factor II) possui um papel fundamental na regulação do desenvolvimento embrionário e na aquisição de destinos específicos. Em CTE humanas, Coup-TFII forma um circuito regulatório que controla a pluripotência, sendo importante para a saída destas células do estado de pluripotência direcionando-as para um destino neural. Visando caracterizar a função de Coup-TFII durante a saída do estado pluripontente e a aquisição de destinos celulares específicos em CTE murinas, a expressão de Coup-TFII foi modulada na linhagem E14-TG2A, a partir da superexpressão e da perda parcial, por silenciamento gênico, e total, por nocaute gênico pela técnica de CRISPR/Cas9. Estas células moduladas para Coup-TFII foram diferenciadas como corpos embrióides ou em camadas únicas de células, e a expressão e marcação de fatores de pluripotência e genes marcadores dos três folhetos germinativos foram avaliadas por PCR quantitativo e imunohistoquímica. Os resultados apontam para um atraso na saída da pluripotência nas células nocauteadas para Coup-TFII. Além disso, o estabelecimento da técnica de CRISPR/Cas9 por este projeto permitiu que a ferramenta de edição de genoma passasse a ser realizada rotineiramente no laboratório, gerando avanços importante nos projetos de pesquisa do grupo e permitindo o estabelecimento novas colaborações com outros laboratórios com interesse nesta tecnologia | |
| dc.description | Abstract: Embryonic Stem Cells (ESC) have been the an important focus of research mainly because of their potential as a model system to study the embryonic development, differentiation of specific cell lineages and somatic cell reprogramming into induced pluripotency cells (iPS) for cellular therapy. With the capacity of self-renewal and its pluripotency, ESC have been broadly used to study the balance between the undifferentiated state (pluripotent) and the determination of specific cell fates in vitro. The transcription factor Coup-TFII (Chicken Ovalbumin Upstream Promoter ¿ Transcription Factor II) has a fundamental role in cell fate decision during embryonic development and has been recently shown to form a regulatory circuit that controls the pluripotency in human ESC, being important for the exit from pluripotency in these cells and directing them to a neural state. In order to characterize the function of Coup-TFII during the exit from the pluripotency state and acquisition of specific cell fates in mouse ESC, we attempted to modulate Coup-TFII expression in the E14-TG2A line through the over expression, gene silencing and gene knockout by CRISPR/Cas9 technique. These Coup-TFII modulated cells were differentiated in Embryoid Bodies or in monolayer of cells, and the expression of pluripotency and markers of the three germ layer were measured by qPCR and imunohistochemistry. The results indicate a delay in the exit from pluripotency in the cells that are Coup-TFII knockout. Moreover, the establishment of the CRISPR/Cas9 technique by this project allowed the routinely use of this genome editing tool in the laboratory, generating important advances in the group¿s projects and allowing the establishment of new collaborations with others laboratories with interest in this technology | |
| dc.description | Mestrado | |
| dc.description | Genetica Animal e Evolução | |
| dc.description | Mestra em Genética e Biologia Molecular | |
| dc.description | 2015/06732-9 | |
| dc.description | FAPESP | |
| dc.format | 1 recurso online (108 p.) : il., digital, arquivo PDF. | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | Multilíngua | |
| dc.publisher | [s.n.] | |
| dc.relation | Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDF | |
| dc.subject | Fator II de transcrição COUP | |
| dc.subject | Células-tronco embrionárias | |
| dc.subject | Diferenciação celular | |
| dc.subject | Camadas germinativas | |
| dc.subject | COUP transcription factor II | |
| dc.subject | Embryonic stem cells | |
| dc.subject | Cell differentiation | |
| dc.subject | Germ layers | |
| dc.title | O papel de Coup-TFII na aquisição de destinos celulares durante a diferenciação de células-tronco embrinoárias = The role of Coup-TFII in the acquisition of cellular fates during the differentiation of embryonic stem cells | |
| dc.title | The role of Coup-TFII in the acquisition of cellular fates during the differentiation of embryonic stem cells | |
| dc.type | Tesis |