Tesis
Estudo comparativo in vitro da biocompatibilidade entre nanofibras de Poli(L-ácido láctico) (PLLA) e PLDL PURAC® para uso na engenharia tecidual = Comparative in vitro analysis of biocompatibility between Poly(L-lactic acid) (PLLA) and PLDL PURAC® nanofibers for use in tissue engineering
Comparative in vitro analysis of biocompatibility between Poly(L-lactic acid) (PLLA) and PLDL PURAC® nanofibers for use in tissue engineering
Registro en:
BENATTI, Ana Carolina Bueno. Estudo comparativo in vitro da biocompatibilidade entre nanofibras de Poli(L-ácido láctico) (PLLA) e PLDL PURAC® para uso na engenharia tecidual = Comparative in vitro analysis of biocompatibility between Poly(L-lactic acid) (PLLA) and PLDL PURAC® nanofibers for use in tissue engineering. 2017. 1 recurso online (55 p.). Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP.
Autor
Benatti, Ana Carolina Bueno, 1987-
Institución
Resumen
Orientador: Paulo Kharmandayan Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Introdução: O poliácido absorvível, poli (L-ácido láctico) (PLLA) é um dos materiais mais utilizados e estudados em engenharia de tecidos, devido a sua biocompatibilidade e biodegradabilidade. O uso de scaffolds (arcabouços) de PLLA tem sido de grande valia para a engenharia de tecidos, pois estes auxiliam na proliferação, migração e diferenciação celular, permitindo uma regeneração tecidual mais eficiente. Métodos: Nesse estudo foi utilizado PLLA sintetizado pelo Instituto Nacional de Biofabricação, a partir da polimerização de abertura do anel lactato. Este PLLA foi utilizado para a manufatura de scaffolds na forma de membranas de nanofibras obtidas pelo processo de eletrofiação. As membranas de nanofibras de PLLA foram então comparadas com membranas eletrofiadas de PLDL ®Purac. A citotoxicidade do material foi avaliada através dos ensaios propostos na norma ISO 10993-5: MTT (Sigma), Live/Dead® (Molecular Probes), Ensaios de Eluição, ContatoDireto e Difusão em Ágar. Os ensaios de MTT e Eluição foram analisados por meio de análise estatística ANOVA. Resultados: O teste de MTT após o período de 24 horas de exposição indicou que as células do tipo fibroblasto em contato com o PLLA apresentaram uma taxa de proliferação maior do que o PLDL Purac®, sendo significativamente diferentes (p<0,05). Entretanto, não houve diferenças estatisticamente significativas entre o controle negativo, PLLA e o PLDL Purac® após 48h e 72h de exposição (p> 0,05). O teste de Eluição não apresentou diferenças estatisticamente significativas entre o controle negativo, PLLA, o PLDL Purac®, após 24h, 48h e 72h da cultura (p> 0,05). O ensaio de Live/Dead® indicou que após 24h, 48h e 72h de exposição dos biomateriais à cultura de fibroblastos, estes não causaram efeito tóxico às células. Os ensaios de Contato Direto e Difusão em Ágar indicaram que a presença dos biomateriais não afetou a morfologia celular, que foi considerada normal, não mostrando sinais de citotoxicidade. Conclusão: Os resultados dos ensaios indicaram que a presença dos biomateriais PLLA e PLDL Purac® não causou efeitos tóxicos à cultura de fibroblastos a que foram expostos. Os resultados dos ensaios também demonstraram que o PLLA é um material biocompatível, com resultados semelhantes ao PLDL Purac®. Assim, o PLLA sintetizado no Instituto Nacional de Biofabricação é um biomaterial biocompatível que pode ser utilizado na manufatura de nanofibras que podem ser adaptadas para diferentes aplicações biomédicas Abstract: Introduction: The absorbable polyacid, poly (L-lactic acid) (PLLA) is one of the most widely used and studied material in tissue engineering, due to its biocompatibility and biodegradability. The use of the PLLA scaffolds has been of great value for tissue engineering, since it supports cell proliferation, migration and differentiation, allowing a more efficient tissue regeneration. Methods: In this study PLLA was synthesized by the National Institute of Biofabrication, using ring-opening polymerization. PLLA was used for the manufacture of scaffolds in the form of nanofiber membranes obtained by the electrospinning process. PLLA nanofibers membranes were then compared to PLDL ® Purac nanofiber membranes. The cytotoxicity of the materials were evaluated through the tests proposed by ISO 10993-5: MTT (Sigma), Live/Dead® (Molecular Assays), Elution, Direct Contact and Agar Diffusion Assays. The MTT and Elution statistical analysis were obtained by ANOVA test. Results: The MTT test after 24 hours of exposure indicated that fibroblast cells in contact with PLLA had a higher proliferation rate than PLDL®Purac, being significantly different (p <0.05). Yet there were no statistically significant differences between the negative control, PLLA and PLDL®Purac after 48h and 72h of exposure (p> 0.05). The Elution test did not show statistically significant differences between the negative control, PLLA and PLDL®Purac, after 24h, 48h and 72h of the culture (p> 0.05). The Live/Dead® assay indicated that in 24h, 48h, and 72h of exposure of the biomaterials to the fibroblast culture, they did not cause toxic effect to the cells. The Direct Contact and Agar Diffusion assays indicated that the presence of biomaterials did not affect the cellular morphology, which was considered normal, showing no signs of cytotoxicity. Conclusion: The results of the tests indicate that the presence of PLLA and PLDL®Purac did not cause toxic effects to the culture of fibroblasts. Test results also demonstrate that PLLA is a biocompatible material, with similar results to PLDL®Purac. Thus, the PLLA synthesized at the National Institute of Biofabrication is a biocompatible biomaterial that can be used in the manufacture of nanofibers that can be adapted for different biomedical applications Mestrado Fisiopatologia Cirúrgica Mestra em Ciências 01-P-1744/2016 CAPES