Orientador: Sílvia de Barros MazonTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: Mulheres obesas apresentam risco aumentado para o câncer de mama, e este tem sido associado a uma alteração de mediadores inflamatórios e adipocinas. A obesidade cursa com um estado inflamatório subclínico e está intimamente relacionada a diversas comorbidades, incluindo a síndrome metabólica (SM). Na vigência da inflamação subclínica, as adipocinas amilóide sérica SAA e adiponectina APN, que possuem funções antagônicas, têm suas concentrações séricas alteradas. Além disso, ambas têm sido associadas com a instalação e a progressão do câncer de mama. O objetivo deste trabalho foi investigar em pacientes com câncer de mama, as relações das adipocinas SAA e APN com a obesidade, com a SM e com as características clínico-patológicas da doença. Desta forma, 196 pacientes na pré- ou pós-menopausa foram classificadas em três grupos: não obesas (NO), n= 42; sobrepeso/obesidade (SP/O), n= 103; e sobrepeso/obesidade com síndrome metabólica (SP/O-SM), n= 51 e todas foram submetidas à análise das concentrações séricas e da expressão proteica de SAA e APN em espécimes cirúrgicos provenientes de mastectomia ou quadrantectomia. As concentrações séricas de SAA foram determinadas por nefelometria e as de APN por imunoensaio enzimático (ELISA). A expressão tecidual das adipocinas foi analisada pelas técnicas de Tissue Microarray (TMA) e imunoistoquímica, em quatro diferentes áreas teciduais: epitélio tumoral (T), epitélio não tumoral (NT), tecido adiposo peritumoral (GP) e distante do tumor (GD). Os grupos SP/O (p=0,0028) e SP/O-SM (p=0,0013), demonstraram concentrações séricas mais elevadas de SAA do que o grupo NO e inversamente, concentrações mais reduzidas de APN (SP/O, p=0,0073 e SP/O-SM, p=0,0002). Concentrações séricas mais elevadas de SAA foram observadas em pacientes com tumores que não expressavam RE (RE-), tanto no grupo total (p=0,009), quanto no subgrupo NO (p=0,043). Também foram detectadas concentrações séricas mais elevadas de APN no grupo total de pacientes com tumores RE- (p=0,011). Estes resultados foram independentes de obesidade (IMC e CA) e estado menopausal. Em relação às análises de expressão proteica, no grupo total de pacientes foram detectadas diferenças de expressão de SAA entre todos os tecidos (? 0,0439), com expressão mais frequente nos tecidos adiposos GP (76,6%) e GD (87,9%), seguidos dos epitélios NT (61,7%) e T (40%). Também foi verificada expressão mais frequente de APN nos tecidos adiposos GP (94,4%) e GD (98,4%) em relação aos epitélios T (82,9%, p? 0,0115) e NT (9%, p< 0,0001), sendo que a diferença também foi significativa entre os epitélios T e NT (p< 0,0001). Quando os tecidos foram analisados quanto à diferença de expressão entre as proteínas, observou-se que a expressão de SAA no epitélio T foi 2,1 vezes menos frequente do que a de APN (p< 0,0001) e no epitélio NT 6,9 vezes mais frequente do que APN (p< 0,0001). A análise de frequência entre as proteínas nos diferentes tecidos dentro de cada subgrupo revelou expressão de SAA no epitélio NT aproximadamente 15 vezes mais frequente do que a de APN no grupo SP/O-SM (p< 0,0001). Em relação à associação da expressão das adipocinas com as características clínico-patológicas do câncer de mama, verificou-se elevada frequência de pacientes com ECP III que não expressavam SAA no tecido adiposo GP. Não foram detectadas associações entre as concentrações séricas e as expressões teciduais das proteínas investigadas. A demonstração de concentrações séricas mais elevadas de SAA e APN em pacientes com tumores RE- sugere um estímulo de respostas sistêmicas antagônicas na vigência de tumores mais agressivos. Já, a detecção de expressão diferencial de SAA e APN no epitélio T poderia ser associada aos efeitos antiproliferativos e pró-apoptóticos de APN no microambiente tumoral. Em contrapartida, SAA mais frequente no epitélio NT, poderia sugerir a presença de maior atividade inflamatória no ambiente peritumoral, que seria ainda mais exacerbada no grupo SP/O-SMAbstract: Obese women are at increased risk for breast cancer, and this condition has been associated with a change of inflammatory mediators and adipokines. Obesity is associated with a low grade chronic inflammation and it is closely related to several comorbidities including the metabolic syndrome (MetS). As part of low grade inflammation, the antagonistic adipokines serum amyloid A (SAA) and adiponectin (APN) have changes in their serum concentrations. In addition, both have also been associated with the development and prognosis of breast cancer. This study aimed to investigate the relationship of SAA and APN with obesity, MetS and with the clinical and pathological features of breast cancer. Thus, 196 patients were classified into three groups: non-obese (NO), n= 42; overweigh/obesity (OW/O), n= 103; and overweight/obesity with MetS (OW/O-MetS), n= 51 and all of them have had SAA and APN serum concentrations and protein expression in surgical specimens from mastectomy and quadrantectomy analyzed. The serum concentrations of SAA and APN were respectively determined by nephelometry and by enzymatic immunoassay (ELISA) and the protein expression by immunohistochemistry tissue microarray (TMA), was done for four different tissue tumor epithelium (T), non-tumor (NT), adipose tissue close to tumor (GP) and adipose tissue distant from tumor (GD). The OW/O (p= 0.0028) and OW/O-MetS (p= 0.0013) groups showed higher serum concentrations of SAA than NO group, and conversely, lower concentrations of APN (OW/O, p= 0.0073 and OW/O-MetS, p= 0.0002). Higher concentrations of SAA were observed in patients bearing RE- tumors from total p= 0.009, and NO group p= 0.043. Higher APN serum concentrations were also detected in patients with RE- tumors from the total group of patients (p= 0.011). Those results were independent of obesity (BMI and WC) and menopausal status. Regarding protein expression in the total group of patients, adipose tissue close to tumor (GP) and distant from tumor (GD) had the higher frequencies of SAA expression, 76.6% and 87.0 respectively, followed by non-tumor (T), 61.7%, and tumor epithelium (T), 40%. Higher frequencies of APN expression were observed in GD (98.4%), GP (94.4%) and T (82.9%) samples, in contrast to 9.0% frequency in NT tissue (p <0.0001). Comparison analyses between SAA and APN expression in each tissue showed that in the tumor epithelium (T) APN frequency expression was 2.1 fold higher than SAA (p <0.0001) and in non-tumor epithelium (NT) SAA was 6.9 fold higher than APN (p <0.0001); in GP and GD APN was respectively 1.2 fold (p <0.0001) and 1.1 fold higher than SAA (p= 0.001 ). The subgroups analyses showed that in OW/O-MetS group NT epithelium the expression frequencies of SAA was around 15 fold higher than APN. Regarding the association of frequency expression of adipokines with the breast cancer clinical and pathological features, we observed enhanced frequency of patients with ECP III, with no expression of SAA in adipose tissue GP. The results demonstrate direct and inverse association respectively of serum SAA and APN with obesity and MetS, but no correlation between adipokines serum concentrations. The fact that the concentrations of both, SAA as APN were related to RE- tumors, would suggest antagonist systemic responses in those patients. Opposite frequency expression between SAA and APN in T and NT epithelium could be associated with anti-proliferative and pro-apoptotic functions of APNDoutoradoCiencias BiomedicasDoutora em Ciências Médicas01P1743/2016CAPES