Orientador: Helena Coutinho Franco de OliveiraDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: Hormônios sexuais modificam o perfil lipoprotéico e o risco de aterosclerose. O objetivo deste trabalho foi investigar o efeito de testosterona sobre os lipídeos plasmáticos e enzimas associadas. Camundongos transgênicos (Tg) para proteína de transferência de colesteril-éster (CETP) e controles (não- Tg) foram estudados após 30 dias de castração ou pseudo-cirurgia (sham) e após 14 dias de suplementação com testosterona por injeções subcutâneas diárias de Durateston (DT), Androgenol (AN) ou placebo (PL). As concentrações plasmáticas de colesterol, triglicérides, ácidos graxos livres, glicose e insulina e as atividades da lipase hepática e da CETP foram semelhantes tanto nos animais castrados comparados aos sham quanto nos animais DT comparados .aos PL No entanto, estes tratamentos induziram modificações significativas da distribuição do colesterol nas lipoproteínas nos animais CETP Tg e não-Tg, as quais foram distintas conforme o genótipo. Em tennos relativos, a deficiência de testosterona nos animais não- Tg provocou aumento de 73 % da VLDL e 79 % da LDL e redução de 11 % da HDL, enquanto nos animais CETP Tg castrados houve aumento de 36 % da LDL e redução de 30 % da HDL. Portanto esses resultados sugerem que a expressão da CETP nos camundongos transgênicos amenizou as modificações desfavoráveis nas apoB-LP observadas nos não-Tg. Em estudos cinéticos com LDL e HDL marcadas radioativamente, verificou-se uma tendência de redução da velocidade de remoção plasmática da LDL e redução do tempo de residência da HDL no plasma dos animais castrados, as quais explicam em parte as alterações das respectivas concentrações plasmáticas destas lipoproteínas. Além disso, a atividade endógena da CETP estava aumentada em 20 % nos animais castrados, contribuindo para redução da HDL nestes animais. A suplementação com testosterona em machos não-Tg e fêmeas CETP Tg também modificou os níveis de apoB-LP. Machos não Xl Tg tratados com DT apresentaram aumento de 42 % da VLDL e 72 % na LDL; remeas CETP Tg tratadas com DI apresentaram aumento de 35 % em VLDL. Concluindo, tanto a deficiência corno a suplementação com testosterona tornaram o perfil lipoprotéico dos camundongos mais aterogênico, independentemente da massa de iipase hepática e de CETP. A magnitude dos efeitos sobre as beta- e alfa-lipoproteínas foi te do genótipo, isto é, da expressão da CETPAbstract: Sex honnones modify the plasma lipoprotein profile and hence the risk of atherosclerosis. ln this study we have investigated the effects of testosterone on plasma lipid and lipoprotein levels and associated enzymes. Transgenic mice (Tg) 1hat express a human cholesteryl ester transfer protein (CETP) minigene with natural flanking sequences and non transgernc (nTg) control mice were studied 30 days after castration or sham operation and 14 days after testosterone supplementation by subcutaneous daily injections of Durateston (DT), Androgenol (AN') Of placebo (PL). Plasma concentrations of cholesterol, triglycerides, free fatty acids, glucose and insulin, as well as the hepatic lipase and CETP activities on exogenous substrates were similar in both conditions, testosterone deficiency (castrated vs. sham) or excess (DT vs. PL) for both groups of mice, CETP Tg and non Tg. However, these treatments induced changes in the cholesterol distribution among plasma lipoproteins that were dependent on the CETP expression. Testosterone deficiency in nTg mice provoked increase of 73 % in VLDL- and 79 % in LDL- and reduction of 11 % in HDL-cholesterol, while in CETP Tg mice there was an elevation of 36 % in LDL- and decrease of 30 % in HDL-cholesterol. Kinetic studies of LDL and HDL labeled with 1311 and 1251, respectively, showed that the LDL fractional plasma removal rate and HDL plasma residence time tend to be lower in CETP Tg castrated as compared to sham mice. These results can explain, at least in pari, the changes in LDL and HDL concentrations in the plasma of the CETP Tg castrated mice. Furthermore, endogenous substrate dependent CETP activity was elevated by 20 % in CETP Tg castrated mice, which contributed to the reduction in HDL-cholesterollevels in these mice. Testosterone ._supplementation induced an increase of 42 % in VLDL- and af 72 % in LDL-cholesterol in X11l, .J the plasma ofnTg mice and a mild 35 % increase in VLDL-cholesterol in plasma offemale CETP Tg mice, while no change was observed in the cholesterol distribution among plasma lipoproteins of male CETP Tg mice. In conclusion, both testosterone deficiency and excess induced a more atherogenic lipoprotein profile in mice, which was independent of the mass ofhepatic lipase and CETP. However, the magnitude ofthe effects were dependent on the CETP expression, which attenuated the elevation on eta-lipoprotein but strengthened the reduction on alpha-lipoprotein cholesterollevelsMestradoFisiologiaMestre em Biologia Funcional e Molecular