Background: The preparation of a standard bilirubin is essential for an adequate quality control of laboratorial bilirubinemia measurements because they are subjected to a large variability in results depending on the dosage method used and the lack of a rigorous standardization of its performance. Once prepared, this standard solution has to be divided in aliquots and stored to be routinely used. Objective: To evaluate the effect of different conditions of the standard solution storage in the stability of bilirubin with the purpose of using it for calibration of equipment used in the dosage of bilirubin in neonates. Methods: After the preparation of standard solution with 25mg/dl of bilirubin, it was stored under 4°C or frozen under - 20°C and - 70°C. During the next nine months, consecutive bilirubin dosages of the standard solution were performed and the results analyzed through the Anova-two-ways. Results: The samples frozen under - 70°C did not present a significant degradation during nine months, while those under - 20°C and 4°C suffered a degradation of 5% and 24,18% of bilirubin levels, respectively, during the period of three months. Conclusion: Storage of standard bilirubin solution under - 70°C is recommended for the maintenance of constant bilirubin concentration.Introdução: O preparo do padrão calibrador de bilirrubina é essencial para um controle adequado das dosagens laboratoriais da bilirrubinemia, visto que estas estão sujeitas a grande variabilidade nos resultados, dependendo do método de dosagem escolhido e da falta de padronização rigorosa na sua execução. Uma vez preparado, este padrão calibrador deve ser dividido em alíquotas e estocado para ser utilizado de rotina. Objetivo: Avaliar os efeitos de diferentes condições de armazenamento de um padrão calibrador de bilirrubina sobre sua estabilidade, com finalidade de calibração de equipamentos utilizados na determinação da bilirrubinemia em neonatos. Material e métodos: Após o preparo de um padrão calibrador com 25mg/dl de bilirrubina, este foi armazenado a 4°C, congelado a - 20°C e a - 70°C. Durante nove meses foram feitas dosagens consecutivas da bilirrubina da solução padrão, as quais foram analisadas através da análise de variância de duas vias com blocagem. Resultados: As amostras congeladas a - 70°C não sofreram degradação significativa nos nove meses estudados, enquanto que, no período de três meses, as congeladas a - 20°C e a 4°C sofreram uma degradação de 5% e 24,18%, respectivamente, dos níveis iniciais de bilirrubina. Conclusão: A estocagem do padrão calibrador de bilirrubina a - 70°C é a recomendada para a preservação dos níveis de bilirrubina.2125