In recent decades, there has been an increase in the studies of isomaltulose obtainment, due to its physicochemical properties and physiological health benefits. These properties, which include low cariogenicity, low glycemic index and greater stability, allow the use of this sweetener as a substitute for sucrose in foods; besides the fact that it can be converted to isomalt, a dietary non-cariogenic sugar alcohol used in pharmaceuticals as well as in the food industry. Isomaltulose (6-O-α-D-glucopyronosyl-1-6-D-fructofuranose) is a disaccharide reducer obtained by the enzymatic conversion of sucrose - the α-glucosyltransferase enzyme. Different treatments were performed for the preparation of whole cells; lysed cells; and crude enzyme extract of Erwinia sp. D12 strain immobilized in calcium alginate. The packed bed column of granules, containing Erwinia sp. cells sonicated and immobilized in calcium alginate (CSI), reached a maximum conversion of 53-59% sucrose into isomaltulose and it presented activity for 480 hours. The converted syrup was purified and the isomaltulose crystallization was performed through the lowering of temperature. The isomaltulose crystals presented purity of 96.5%.Nas últimas décadas, houve um incremento nos estudos da obtenção da isomaltulose, devido às suas propriedades físico-químicas e fisiológicas benéficas à saúde. Propriedades que incluem a baixa cariogenicidade, baixo índice glicêmico e maior estabilidade, propiciam o uso deste adoçante como substituinte da sacarose em alimentos, além de poder ser convertido para isomalte, um açúcar álcool dietético e não cariogênico aplicado na indústria de alimentos e farmacêutica. A isomaltulose (6-O-α-D-glucopyronosyl-1-6-D-fructofuranose) é um dissacarídeo redutor obtido através da conversão enzimática da sacarose, pela enzima α-glicosiltransferase. Foram realizados diferentes tratamentos para a preparação de células íntegras, células lisadas e extrato enzimático bruto da linhagem Erwinia sp. D12 imobilizados em alginato de cálcio. A coluna de leito empacotado de grânulos contendo células de Erwinia sp. sonicadas e imobilizadas em alginato de cálcio (CSI) atingiu máxima conversão de 53-59% de sacarose em isomaltulose e apresentou atividade por 480 horas. O xarope convertido foi purificado e a cristalização da isomaltulose foi realizada por abaixamento de temperatura. Os cristais de isomaltulose apresentaram pureza de 96,5%.257263Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)