En el proceso de industrialización de los cítricos se obtienen semillas como subproducto, estas contienen limonoides (triterpenoides oxigenados), quienes están relacionados con el amargor de los cítricos, además, muestran bioactividades como anticancerígenos, antivirales y antitumorales. Por lo que el objetivo de este trabajo, fue evaluar la citotoxicidad in vitro de extractos de semillas de Citrus aurantifolia swingle, Citrus sinensis y Citrus reticulata utilizando dos solventes (metanol y acetona) y dos tiempos de extracción (5 y 8 horas) sobre linfoblastos de leucemia L5178Y. Los extractos con metanol presentaron un rendimiento mayor (8,6% ± 0,44) respecto al extracto con acetona (6,2% ± 0,40), mientras que el tiempo de extracción no lo afectó. El rendimiento fue similar entre Citrus sinensis (6.1% ± 0.54) y Citrus reticulata (5,2% ± 0,6) y mayor para Citrus aurantifolia Swingle (11 ± 0,5%). La citotoxicidad de los extractos de Citrus aurantifolia Swingle no se afecta por el solvente, ni por el tiempo de extracción, mostrando una CD50 menor de 40μg/ml, sin embargo los extractos de Citrus sinensis y Citrus reticulata presentan una diferencia significativa en el tipo de solvente y tiempo de extracción, observándose una mayor citotoxicidad para Citrus sinensis, CD50 de 50 μg/ml, con acetona y 8 horas, y para Citrus reticulata, mostró mayor citotoxicidad, CD50 95μg/ml, con metanol y 5 horas. Estos resultados muestran que la citotoxicidad se ve afectada por el tipo de solvente y por el tiempo de extracción para Citrus reticulate y Citrus sinensis, y no así para Citrus aurantifolia swingle.