Tesis
Atividade antiproliferativa e ação estrogênica/antiestrogênica de extratos e frações de algumas espécies de "Mentha" (Lamiaceae)
Antiproliferative activity and estrogenic/anti-estrogenic action of extracts and fractions of some species of "Mentha" (Lamiaceae)
Registro en:
Autor
Fiorito, Giovanna Francisco, 1986-
Institución
Resumen
Orientadores: Ana Lúcia Tasca Gois Ruiz, Mary Ann Foglio e João Ernesto de Carvalho Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: Há tempos, os produtos naturais têm revelado sua importância na prevenção e tratamento de doenças como o câncer, HIV/AIDS, Alzheimer e malária. A ação hormonal sobre a proliferação celular é amplamente reconhecida. Diversos produtos naturais podem interferir nesse processo tais como os fitoestrógenos, servindo de incentivo na busca de novos tratamentos para distúrbios hormonais. Espécies do gênero Mentha (Lamiaceae) são utilizadas, popularmente, para promoção de lactação, indução de aborto, diminuição da libido masculina, tratamento de síndrome pré-menstrual e como contraceptivo, podendo se tratar de um gênero com potencial para o tratamento de distúrbios hormonais. Este trabalho avaliou a atividade antiproliferativa e a ação estrogênica/antiestrogênica dos extratos e frações de algumas espécies de Mentha cultivados no campo experimental do CPQBA/Unicamp, buscando evidenciar possíveis correlações entre essas ações e elucidar os constituintes químicos envolvidos. A avaliação antiproliferativa in vitro dos extratos brutos diclorometânicos (EBD) e etanólicos (EBE) de três espécies de Mentha (M. piperita, M.arvensis e M. aquatica) sugeriu uma possível correlação entre a atividade antiproliferativa e ação hormonal para o EBD de M. piperita, uma vez que os resultados antiproliferativos foram promissores para as linhagens tumorais humanas MCF7 e OVCAR-3. A partir do EBD de M. piperita foi obtida a fração F4/5/6, a qual apresentou atividade antiproliferativa em painel de linhagens tumorais humanas in vitro. Esta atividade foi confirmada in vivo pelos modelos de tumor sólido de Ehrlich, no qual foi capaz de inibir o crescimento tumoral após tratamento por via oral; e no modelo de Hollow Fiber, por meio da inibição da proliferação celular da linhagem MCF7, encapsulada em fibras de polivinilideno. A avaliação quanto ao mecanismo de morte celular por citometria de fluxo, pelo método de Anexina-V, revelou que a fração F4/5/6 (50 e 100 µg/mL) induziu a exposição de resíduos de fosfatidilserina na superfície externa da membrana citoplasmática de células da linhagem MCF7 BUS tratadas por 24 horas, o que sugeriu uma relação com morte celular por apoptose. A análise do ciclo celular por citometria de fluxo sinalizou o acúmulo das células de mama estrógeno-dependentes MCF7 BUS na fase G1 do ciclo. Por fim, a atividade antiestrogênica observada pelo modelo E-screen foi corroborada pelos resultados dos testes Uterotróficos, nos quais a fração F4/5/6 foi capaz de bloquear o efeito proliferativo do estradiol tanto em células MCF7 BUS quanto no útero de ratas pré-púberes. Os resultados obtidos neste trabalho fornecem subsídios promissores para o uso da fração F4/5/6 como possível agente modulador de ER para a terapia e tratamento de neoplasias de mama hormônio dependentes Abstract: For some time, natural products have proven their importance in the prevention and treatment of diseases such as cancer, HIV / AIDS, Alzheimer's and malaria. The hormonal action on cell proliferation is widely recognized. Many natural products can interfere with this process such as phytoestrogens, serving as an incentive in the search for new treatments for hormonal diseases. Popular uses of the genus Mentha (Lamiaceae) include promotion of lactation, inducing abortion, decrease in male libido, treat pre-menstrual syndrome and as a contraceptive. This study aimed to assess the antiproliferative activity and (anti) estrogenic action of extracts and fractions of some Mentha species cultivated in the experimental field of CPQBA / Unicamp, seeking evidence of possible correlations between these actions and elucidate the chemical constituents involved. The antiproliferative in vitro evaluation of dichlorometane (EBD) and ethanol (EBE) crude extracts of three Mentha species (M. piperita, Mentha aquatica and M.arvensis) suggested a possible hormonal activity for M. piperita's EBD, with promising results for MCF7 and OVCAR-3 tumor cell lines. From Mentha piperita's EBD was obtained the F4/5/6 fraction. This activity was confirmed by in vivo Ehrlich's solid tumor model, in wich was able to inhibit tumor growth after oral treatment; and by Hollow Fiber model, by inhibiting the proliferation of MCF7 cell line, wrapped in polyvinylidene fibers. The evaluation of cell death's process by Annexin method, showed that the F4/5/6 fraction (25, 50 and 100 ug / ml) induced the exposure of phosphatidylserine residues outside the cytoplasmic membrane of MCF7 BUS cell line treated for 24 hours, suggesting a relationship to cell death by apoptosis. The cell cycle analysis by flow cytometry signaled blockage of G1's phase in the cycle. Finally, the antiestrogenic activity accessed by E-screen model was corroborated by the results of uterotrophic tests, in which F4 /5/6 was able to block the proliferative effect of estradiol in both MCF7 BUS cells and the imature uterus of rats. The results obtained in this study provide promising benefits to the use of fraction F4 / 5/6 as possible ER modulating agent for therapy and treatment of hormone dependent breast cancers Doutorado Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica Doutora em Odontologia 2011/14803-2 FAPESP