Padroniza????o de t??cnicas de isolamento de c??lulas de Langerhans imaturas e desenvolvimento de um modelo tridimensional de pele humana para testes de sensibilidade in vitro
Standardization of techniques for isolation of immature Langerhans cells and development of a tree-dimensional human skin model for in vitro
| dc.contributor | Monica Beatriz Mathor | |
| dc.creator | LUCO, DAYANE P. | |
| dc.date | 2014 | |
| dc.date | 2014-12-19T17:52:28Z | |
| dc.date | 2014-12-19T17:52:28Z | |
| dc.date.accessioned | 2023-09-28T12:50:25Z | |
| dc.date.available | 2023-09-28T12:50:25Z | |
| dc.identifier | http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/23179 | |
| dc.identifier | 10.11606/D.85.2014.tde-31102014-140755 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8982435 | |
| dc.description | A pele ?? o maior ??rg??o do corpo humano e constitui a principal defesa do organismo contra agentes f??sicos e qu??micos, sendo tamb??m fundamental para evitar a perda de ??gua por desseca????o. Formada por tr??s camadas distintas, mas complementares, sendo as duas principais denominadas derme e epiderme, contendo diferentes tipos celulares, como fibroblastos, queratin??citos, melan??citos, c??lulas de Merkel e c??lulas de Langerhans, sendo que estas ??ltimas desempenham um papel fundamental na hipersensibilidade de contato. Devido ?? import??ncia da manuten????o da pele saud??vel para a vida humana, existe uma crescente necessidade da elabora????o de substitutos de tecidos para o tratamento de feridos e doentes, assim como, h?? grande demanda de pele para testes qu??micos das ??reas farmac??utica e cosm??tica. Outro fator de fundamental import??ncia para o desenvolvimento de m??todos alternativos in vitro, ?? a press??o mundial para que estes testes substituam os modelos animais. Esta abordagem vai de encontro aos novos conceitos de substitui????o, redu????o e refinamento na utiliza????o de animais em estudos cient??ficos, ditando o futuro da cultura celular e bioengenharia de tecidos. Gra??as ao grande desenvolvimento do cultivo celular e descoberta de que as c??lulas cultivadas podem ser reagrupadas de acordo com o delineamento experimental, se torna poss??vel ?? cria????o de equivalentes dermoepid??rmicos para estudos in vitro, como por exemplo, testes de cito e fototoxicidade ou avalia????o da fase inicial da rea????o al??rgica e processos de sensibiliza????o da pele. Neste caso, se faz necess??ria a obten????o de grande quantidade de c??lulas de Langerhans imaturas. As c??lulas de Langerhans (CLs) s??o c??lulas dendr??ticas imaturas localizadas na epiderme e epit??lio superficial que desempenham um papel central na imunidade da pele, agindo como verdadeiras sentinelas capazes de captar ant??genos de contato. Desta forma, foram testados quatro diferentes protocolos para extra????o e criopreserva????o destas c??lulas, sendo ainda analisadas as suas caracter??sticas morfol??gicas e fenot??picas. Obtivemos resultados n??o expressivos quanto ao isolamento, pureza e marca????o positiva para CD1a no Protocolo 2 (Expansor de Pele). Os Protocolo 1A (Coleta de Sobrenadante) e 3 (Epiderme + Gradiente de Ficoll Paque) ofereceram altos n??veis de c??lulas marcadas positivamente para CD1a, apresentando a mesma qualidade de marca????o. No entanto, o Protocolo 3 forneceu um maior n??mero de c??lulas vi??veis, e uma maior pureza da amostra, uma vez que s?? utiliza a epiderme para a obten????o da suspens??o de c??lulas, o que o coloca como modelo a ser seguido em posteriores experimentos. Os m??todos aqui apontados como mais promissores, podem ser reproduzidos em laborat??rios de cultura celular convencionais, contribuindo para aumentar a reprodutibilidade e confiabilidade de resultados experimentais relativos ??s CLs. Da mesma forma, avaliamos a utiliza????o dos equivalentes de pele humana para a realiza????o de testes in vitro de cito e fototoxicidade, os quais podem de fato reduzir a utiliza????o de modelos animais para identifica????o do perfil t??xico de uma subst??ncia ou de formula????es mais complexas. | |
| dc.description | Disserta????o (Mestrado em Tecnologia Nuclear) | |
| dc.description | IPEN/D | |
| dc.description | Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP | |
| dc.format | 95 | |
| dc.rights | openAccess | |
| dc.subject | skin | |
| dc.subject | animal cells | |
| dc.subject | populations | |
| dc.subject | animal tissues | |
| dc.subject | three-dimensional calculations | |
| dc.subject | phantoms | |
| dc.subject | structural models | |
| dc.subject | in vitro | |
| dc.subject | rats | |
| dc.subject | in vivo | |
| dc.subject | cell cultures | |
| dc.subject | standardization | |
| dc.title | Padroniza????o de t??cnicas de isolamento de c??lulas de Langerhans imaturas e desenvolvimento de um modelo tridimensional de pele humana para testes de sensibilidade in vitro | |
| dc.title | Standardization of techniques for isolation of immature Langerhans cells and development of a tree-dimensional human skin model for in vitro | |
| dc.type | Disserta????o | |
| dc.coverage | N | |
| dc.local | S??o Paulo |