Thesis
Participação da via do Hedgehog na fibrose hepática da esquistossomose mansoni humana e murina experimental.
Fecha
2015Registro en:
PEREIRA, T. de A.Participação da via do Hedgehog na fibrose hepática da esquistossomose mansoni humana e murina experimental. 2015. 100 f. il. Tese (Doutorado em Patologia) – Universidade Federal da Bahia. Fundação Oswaldo Cruz, Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz, Salvador, 2015.
Autor
Pereira, Thiago de Almeida
Institución
Resumen
INTRODUÇÃO/OBJETIVO: A esquistossomose mansonica é causa importante de fibrose hepática e
hipertensão porta em regiões tropicais, e a patogênese da fibrose não está bem esclarecida. Como a via do
hedgehog e um dos seus genes alvos, a osteopontina, estão envolvidos em fibroses hepáticas de outras
etiologias o objetivo foi investigar a ativação destas vias na esquIsitossomose humana e murina
experimental, no intuito de verificar o seu envolvimento no desenvolvimento da forma hepatoesplênica da
esquistossomose mansonica (FHE). MATERIAL E MÉTODOS: 87 biópsias em cunha de fígados de
pacientes com FHE submetidos a cirurgia e fragmentos de fígado de camundongos suiços infectados com
Schistosoma mansoni foram submetidos a métodos imunohistoquímicos e de biologia molecular para
avaliar a expressão de ligantes hedgehog (Ihh, Shh), receptor Patched, fatores de transcrição Gli 1 e 2 e
osteopontina. Osteopontina sérica e ligante Shh do hedgehog foram avaliados em camundongos suíços
infectados e os de osteopontina em camundongos CBA/J infectados e em pacientes com FHE e forma
hepatointestinal da esquistossomose. In vitro foi avaliado o efeito de antígeno solúvel do ovo (SEA) em
células de Kuppfer, células estreladas, macrófagos, colangiócitos e células endoteliais sinusoidais
hepáticas. A relação com a via da IL-13 foi avaliada em camundongos geneticamente deficientes ou
hiperexpressando a citocina. Foi avaliado in vitro se a IL-13 induz ligantes hedghog ou ativação da via em
células de Kuppfer. RESULTADOS: Os resultados mostraram: (a) aumento expressão de ligantes Ihh, de
fatores de transcrição Gli2 e de osteopontina no fígado de camundongos suíços infectados com
Schistosoma mansoni, aumento de shh e osteopontina no plasma de camundongos suíços e de
osteopontina no plasma de camundongos CBA/J infectados com S. mansoni; (b) aumento na expressão de
Ihh, Shh, Gli1 e 2, receptor Patched e de osteopontina no fígado de pacientes com esquistossomose e
aumento da osteopontina sérica em pacientes com a FHE; (c) A expressão de ligantes hedgehog e de Gli2
foi observada em macrófagos, células estreladas, ductos biliares e células endoteliais, e a de osteoponina
em ductos biliares, macrófagos e células estreladas/miofibroblastos; (d) correlação positiva entre ativação
do hedgehog (Gli2 e osteopontina) e fibrose, no modelo murino experimental e nos pacientes; nestes a
correlação também foi observada com o grau de fibrose classificada pelo ultrassom e com a hipertensão
porta; (e) Inibição in vitro do hedgehog com ciclopamina e vismodegib ou por nocauteamento condicional
de receptor Smoothened bloqueou a ativação alternativa de macrófagos e inibiu a angiogênese a partir de
células endoteliais sinusoidais hepáticas; (f) que o bloqueio da via da IL-13 reduziu e a hiperexpressão
aumentou a ativação da via do hedgehog e IL-13 diretamente induziu, in vitro, produção de ihh em
células de Kupffer de camundongos e de humanos, demonstrando a inter-relação das duas vias.
CONCLUSÃO: Pode-se concluir que a via do hedgehog tem participação importante na patogênese da
fibrose hepática esquistossomótica, atuando através de estímulos à fibrogênese e à angiogênese e que a
osteopontina é candidata a ser um biomarcador de intensidade da fibrose e da hipertensão porta na
doença.