Tesis Doctorado
Evaluación de la participación de tcap1 y tcap2 en la vía de reparación por escisión de bases (ber) del dna en trypanosoma cruzi y su rol en la sobrevida del parásito frente a estrés oxidativo
Autor
Sepúlveda-Contreras, Sofía Elizabeth
Institución
Resumen
Trypanosoma cruzi (T. cruzi) es un protozoo hemoflagelado agente causal de la enfermedad de Chagas. Se presenta en tres formas celulares: epimastigote, amastigote y tripomastigote, estas dos últimas presentes en hospederos mamíferos. Este parásito sobrevive al daño del DNA por especies reactivas (ROS/RNS) durante todo su ciclo de vida. En esta tesis se propuso que T. cruzi sobrevive al daño oxidativo por activación del mecanismo de reparación del DNA por escisión de bases (vía BER). Este es un proceso altamente conservado en el que las endonucleasas apurínicas/apirimidínicas (APEs) juegan un rol fundamental. Consecuente con esta propuesta, en trabajos previos realizados se observó que la viabilidad de epimastigotes y tripomastigotes sometidos a diferentes concentraciones de peróxido de hidrógeno y peroxinitrito disminuye significativamente cuando se tratan simultáneamente con un inhibidor de APEs.En esta tesis se determinó la expresión, funcionalidad e importancia de dos APEs, TcAP1, ortóloga de APE1 humana, y TcAP2, ortóloga de APE2 humana y de Apn2 de Schizosaccaromyces pombe. Se pudo comprobar que la viabilidad de epimastigotes que sobreexpresan alguna de estas endonucleasas aumenta frente a estrés oxidativo comparado con epimastigotes controles. Por otra parte, la inhibición de la actividad endonucleasa AP en el parásito mediante el uso de un dominante negativo disminuye su viabilidad frente a especies reactivas.Estos resultados confirman la participación de la vía BER en la resistencia de T. cruzi al daño oxidativo al DNA a través de la activación de APEs específicas del parásito. Esto hace factible el comienzo de la búsqueda de inhibidores específicos de dichas enzimas, que podrían potenciar el efecto citotóxico del daño oxidativo al DNA generado por las células del hospedero, como tratamiento alternativo o complementario para la enfermedad de Chagas. PFCHA-Becas Doctor en Ciencias Biomédicas 120p. PFCHA-Becas TERMINADA