Tesis Doctorado
Participación de la adipoquina leptina y sus vías de señalización intracelular en la fibrosis de células endoteliales
Autor
Becerra-Farfán, Álvaro Alejandro
Institución
Resumen
The aim of this thesis was to investigate the participation of leptin induces an endothelial fibrosis and to study the intracellular mechanism that promotes this process. Our results demonstrated that EC exposed to high doses of leptin acquire fibroblasts features mediating the conversion of EC in activated fibroblasts. Leptininduced fibrotic conversion was determined by changes in morphology and protein expression pattern. Results showed a leptin-induced fibrotic-like EC morphology compared to EC in absence of leptin, showed in vitro and in vivo. It was found a decreasing of the endothelial markers VE-Cadherin and CD-31 and an increasing in the expression of the fibroblast-specific proteins, α۔smooth muscle actin (α-SMA) and fibroblast-specific protein-1 (FSP-1). Furthermore, extracellular matrix (ECM) proteins, fibronectin (FN) and collagen type III (Col III), were also increased uponXVI exposition to high doses of leptin. Also, it was possible to determine an increase in ECM in the endothelium of conduction vessels in a hyperleptinemic rat model. We show that ALK5 may be activated by leptin-induced TGFβ-1 secretion through an autocrine/paracrine manner to inducing conversion of EC into myofibroblasts. In addition, the EC signaling pathways induced by leptin ERK 1/2 and AKT1, play a key role in endothelial fibrosis induced by a hyperleptinemic condition. The principal conclusions are that leptin induce conversion of EC into myofibroblasts via the secretion of TGF-β1, through an ALK5 activity–dependent mechanism. This is dependent on the activity of the proteins ERK 1/2 and AKT1. The results provided here, contribute to our understanding of pathophysiology of sepsis, revealing a novel pathogenic mechanism involved in sepsis and other inflammatory diseases. El objetivo de esta tesis fue investigar la la participación de leptina en la fibrosis endotelial y estudiar los mecanismos intracelulares que promueven este proceso.Nuestros resultados demostraron que CE expuestas a altas dosis de leptina adquieren un fenotipo fibrótico. Esta conversión inducida por leptina, se determinó mediante los cambios en la morfología celular y el patrón de expresión de proteínas implicadas a este proceso. Los resultados nos muestran, que CE expuestas a altas dosis de leptina cambian a una morfología fibrótica, disminuyenXIV sus marcadores endoteliales VE-Caderina y CD-31, y aumentan la expresión de las proteínas específicas de fibroblastos como, la actina del músculo liso (α-SMA) y la proteína 1 específica del fibroblasto (FSP-1). Además, las proteínas de la matriz extracelular (MEC) fibronectina (FN) y colágeno tipo III (Col III) también aumentan su nivel de expresión celular. El endotelio de vasos de conducción de ratas hiperleptinémicas también muestra un aumento de la MEC y una disminución en la marca endotelial. Adicionalmente se determinó, que la conversión de CE en miofibroblastos inducida por leptina, depende de la secreción de TGFβ-1 y posterior actividad de su receptor de membrana ALK5. Donde las vías de señalización inducidas por leptina ERK 1/2 y AKT1, cumplen un rol clave en la transición de endotelio a fibroblasto activado. Las principales conclusiones de esta tesis, nos muestran que la leptina induce la conversión de CE en miofibroblastos, a través de un mecanismo dependiente de la secreción de TGF-β1 y la consecuente actividad de ALK5. Las proteínas ERK 1/2 y AKT1 son necesarias en el desarrollo de la fibrosis endotelial inducida por leptina. Esperamos que nuestros resultados aporten antecedentes para comprender el mecanismo mediante el cual, una condición hiperleptinémica induce fibrosis endotelial, y así aportar en el entendimiento de la patogénesis del síndrome séptico PFCHA-Becas PFCHA-Becas