Estudio de la función de RIC-8A en la remodelación del citoesqueleto de actina durante la migración celular
Study of the Ric-8A function in actin cytoskeleton remodeling during cell migration
| dc.contributor | Torrejón Quezada, Marcela Eliana | |
| dc.contributor | Henríquez Hohmann, Juan Pablo | |
| dc.contributor | UNIVERSIDAD DE CONCEPCION | |
| dc.creator | Beyer Soto, Andrea Wilma | |
| dc.date | 2022-01-04T15:43:04Z | |
| dc.date | 2022-08-23T12:20:42Z | |
| dc.date | 2022-01-04T15:43:04Z | |
| dc.date | 2022-08-23T12:20:42Z | |
| dc.date | 2021 | |
| dc.date.accessioned | 2023-08-21T21:04:54Z | |
| dc.date.available | 2023-08-21T21:04:54Z | |
| dc.identifier | 21130037 | |
| dc.identifier | https://hdl.handle.net/10533/253086 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8282152 | |
| dc.description | La migración celular, consistente en la traslación de las células o porciones de ellas de un lugar a otro, es un proceso altamente complejo que depende de la correcta coordinación de la extensión de la membrana plasmática, de la adhesión dinámica de la célula al sustrato y de la contracción de las fibras de actina – miosina, eventos que se basan en la remodelación del citoesqueleto. Estudios realizados en nuestro laboratorio y por otros grupos de investigación, vinculan la actividad de Ric-8A, una proteína con actividad GEF sobre diferentes subunidades Gα, con el proceso de migración celular. Ejemplo claro de ello es que el silenciamiento de Ric-8A en embriones de Xenopus tropicalis inhibe la migración de células de la cresta neural craneal, reduce el número de adhesiones focales establecidas, altera la polaridad celular y disminuye el tamaño de las protrusiones generadas. A pesar de la evidencia existente de los defectos celulares presentes en ausencia de Ric-8A, no se conoce el mecanismo molecular mediante el cual esta proteína regula la migración y otros procesos celulares ligados a la estructuración del citoesqueleto. Es por ello, que en este trabajo se estudió la función de Ric-8A en la remodelación del citoesqueleto de actina durante la migración. A través del uso de ensayos de cierre de herida se determinó que la deficiencia de Ric-8A provoca un aumento en la velocidad de migración de células NIH3T3 sin alterar la direccionalidad del movimiento. Además, se encontró que Ric-8A se concentra en los bordes de las protrusiones de diferentes tipos de células en migración. Al analizar el efecto de la deficiencia de Ric-8A en la adhesión célula - sustrato, no se encontró un efecto evidente sobre el número ni tamaño de adhesiones focales; sin embargo, se observó que las células carentes de Ric-8A se adhieren más rápido a fibronectina en comparación a las células control. En último lugar se procedió a realizar un análisis de espectrometría de masas para identificar a las proteínas que forma complejos con Ric8A, encontrándose entre ellas proteínas Gα y, de forma interesante, a α-tubulina y vinculina. Estos resultados en conjunto nos permiten concluir que Ric-8A controla la migración celular a través de la regulación de las vías de señalización dependientes de GTPasas y de su acción directa sobre proteínas componentes de las estructuras celulares que permiten la motilidad. | |
| dc.description | Cell migration, the movement of a cell or a part of it from one place to another, is a highly complex process that depends on the accurate coordination of membrane extension, the dynamic cell - substrate adhesion and the contraction of actin – myosin fibers, events that rely on actin cytoskeleton remodeling. Studies of our lab and other research groups have related cell migration to the activity of Ric-8A, a protein that has GEF activity over different Gα subunits. A clear example of that is the fact that Ric-8A silencing in Xenopus tropicalis embryos inhibits cranial neural crest cells migration, reduces the stablished focal adhesions number, alters cell polarity, and diminishes the protrusion size. Despite the evident defects which affect a cell in the absence of Ric-8A, the mechanism by which this protein regulates cell migration and other cytoskeleton remodeling dependent processes remains unknown. The aim of this work was to study the function of Ric-8A on actin cytoskeleton remodeling during cell migration. Wound healing assays showed that Ric8A deletion enhances NIH3T3 cells migration speed in spite of any significant alteration in cell directionality. We found that Ric-8A is concentrated in the protrusion edges of different migrating cell types. When analyzing the effect of Ric-8A depletion on cell - substrate adhesion, no differences were observed in the focal adhesions number and size; nevertheless Ric-8A-depleted cells adhere faster to fibronectin when compared to control cells. Finally, a mass spectrometry assay was used to identify Ric-8A interacting partners, being among them different Gα subunits and, interestingly, α-tubulin and vinculin. These results show that Ric-8A controls cell migration by regulating GTPases-dependent signaling pathways and by its direct action on proteins which are component of the structures that allow cell motility. | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.relation | instname: Conicyt | |
| dc.relation | reponame: Repositorio Digital RI2.0 | |
| dc.relation | info:eu-repo/grantAgreement//21130037 | |
| dc.relation | info:eu-repo/semantics/dataset/hdl.handle.net/10533/93488 | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ | |
| dc.subject | Ciencias Naturales | |
| dc.subject | Otras Ciencias Naturales | |
| dc.title | Estudio de la función de RIC-8A en la remodelación del citoesqueleto de actina durante la migración celular | |
| dc.title | Study of the Ric-8A function in actin cytoskeleton remodeling during cell migration | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion | |
| dc.type | Tesis |