Los ciclótidos son una gran familia de péptidos cíclicos de origen vegetal con 28-37 residuos de aminoácidos que contiene un esqueleto peptídico circular y un nudo de cistina. Estos compuestos se han encontrado en plantas de las familias Violaceae, Rubiaceae, Cucurbitaceae y Fabaceae; poseen diversas actividades biológicas, entre las cuales se encuentran anti-VIH, anti-cáncer, uterotónica, bactericida, fungicida, citotóxica y hemolítica. Dado que Colombia es un país diverso en especies vegetales y gran parte de los ciclótidos encontrados corresponden a plantas de la familia Violaceae, se planteó como objetivo principal caracterizar los ciclótidos de Leonia triandra (Violaceae) y evaluar su posible actividad contra Mycosphaerella fijiensis Morelet, agente causal de la Sigatoka Negra en los cultivos de plátano y banano; puesto que no existen reportes sobre el estudio de estas miniproteínas en esta especie, ni su acción sobre la Sigatoka Negra. Se obtuvieron los extractos de metanol y DCM-MeOH (1:1) obtenidos por maceración pasiva; el extracto de DCM-MeOH (1:1) de Leonia triandra se purificó en un soporte de octadecilsilano (C18). El extracto metanólico de Leonia triandra se purificó inicialmente en un soporte de Poliamida 6S; posteriormente, se realizó el fraccionamiento por una columna de Sephadex G-10 para eliminar compuestos polisacáridos; finalmente, los ciclótidos fueron purificados mediante cromatografía de columna flash usando un soporte de octadecilsilano (C18). La purificación final se realizó por medio de Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia Preparativa. La presencia de ciclótidos en ambos extractos fue evidenciada por cromatografía de capa delgada y líquida acoplada a espectrometría de masas, donde se detectaron compuestos con masas similares a ciclótidos reportados hasta la fecha. Finalmente, los extractos de Leonia triandra y una de las fracciones ricas en ciclótidos fueron evaluadas contra el hongo Mycosphaerella fijiensis Morelet, por el método de crecimiento radial del micelio y la elongación del tubo germinativo de las ascosporas, pero no se evidenció actividad fungicida.The ciclótidos are a large family of cyclic peptides from plants with 28-37 amino acid residues, containing a circular peptide backbone and cysteine knot. These compounds have been found in plants of the family Violaceae, Rubiaceae, Cucurbitaceae and Fabaceae; they have diverse biological activities, which are anti-HIV, anti-cancer, uterotonic, bactericide, fungicide, cytotoxic and hemolytic. Colombia is a country diverse in plant species and many of the cyclotides found in plants, are from the family Violaceae, was proposed to characterize the cyclotides of Leonia triandra (Violaceae) and evaluate its potential fungicide activity against Mycosphaerella fijiensis Morelet, agent that cause of Black Sigatoka in banana and plantain crops, there aren’t reports on the study of these mini-proteins in this species. Were studied methanol and DCM-MeOH (1:1) extracts obtained by maceration passive with solvents, the DCM-MeOH (1:1) extract of Leonia triandra was purified on an octadecylsilane support (C18). The methanol extract of Leonia triandra was purified initially in a polyamide support 6S, subsequently a fractionation was performed on a column of Sephadex G-10 to remove polysaccharides, and finally, the cyclotides were purified by flash column chromatography using a support octadecylsilane C18. The Final purification was performed by High Performance Liquid Chromatography Preparative. The cyclotides present in both extracts was evidenced by thin layer chromatography and liquid chromatography/mass spectrometry; compounds were detected with masses similar to cyclotides reported to date. Finally, extracts of Leonia triandra and one rich fraction in cyclotides, were evaluated against Mycosphaerella fijiensis Morelet, by the method of radial growth and elongation of germ tube, but did not show fungicidal activity.