Thesis
Diferenciación cardiomiogénica in vitro de células madre mesenquimales aisladas del cordón umbilical humano
Autor
Selvitella Luna, Silvia Emilia
Institución
Resumen
RESUMEN
Las células madre mesenquimales (CMM) son células multipotentes con la capacidad de diferenciarse a linajes del mesodermo embrionario, tal como el linaje cardíaco. Aunque se aislaron por primera vez de la médula ósea (MO), se ha demostrado que el cordón umbilical (CUH) posee poblaciones de CMM en sus regiones, convirtiéndolo en una fuente alternativa para obtenerlas, que a diferencia de la MO es un material de descarte luego del parto y no requiere de procesos quirúrgicos para su obtención.
Tomando en cuenta su capacidad de diferenciación hacia el linaje cardíaco y la presencia de estas en el CUH, en este trabajo se indujeron las CMM del CUH a un etapa temprana de diferenciación cardíaca utilizando dos estrategias inductoras, con el interés de contribuir con protocolos para obtener cardiomiocitos o células progenitoras cardíacas que puedan utilizarse en tratamientos celulares de enfermedades cardíacas en un futuro.
Para cumplir con este objetivo, se aislaron las CMM mediante la técnica de explantes y disgregación enzimática de las diferentes regiones del CUH, las cuales se caracterizaron con coloraciones de rutinas e inmunocitoquímica con el anticuerpo anti-vimentina y luego se indujeron a un proceso de diferenciación hacia el linaje cardiomiogénico utilizando medios condicionados y co-cultivos con células cardíacas provenientes de corazones de fetos de ratón por 15 días. La diferenciación cardiomiogénica se evaluó mediante coloraciones de rutina, con la tinción hematoxilina fosfotungstica ácida (PTAH), y por la presencia de la proteína desmina, como también, particularmente en las CMM inducidas con sistemas de co-cultivo, mediante cortes histológicos de los agregados formados y electroforesis de proteínas.
Palabras claves: Cardiomiocitos, Células madre mesenquimales, co-cultivos, diferenciación cardíaca, medios condicionados. Tutor: Dra Elizabeth Merentes