| dc.description.abstract | La PAC corresponde a la inflamación y destrucción de los tejidos
perirradiculares causada por la infección bacteriana de la pulpa dental, que
genera una activación de la respuesta inmune. Esta respuesta del hospedero
involucra una serie de elementos celulares y mediadores moleculares, entre
ellos, las MMPs, enzimas estructuralmente relacionadas, pero genéticamente
distintas que degradan componentes de la MEC. Éstos mediadores y sus
inhibidores, como α2-macroglobulina (α2m) y TIMPs, han sido estudiados a
partir de biopsias de LPAs, exudado periapical y FGC. Éste último presenta
ventajas sobre estos métodos tradicionalmente utilizados. Por ende, se plantea
que existe un aumento en los niveles y actividad de las MMPs -2, -9 y -13, y
niveles reducidos de α2m en dientes con PAC en comparación con controles sin
patología periapical, cambios que se ven reflejados en el FGC. El objetivo de
este estudio es caracterizar los niveles y actividad de las MMPs -2, -9 y -13, y de
α2m en el FGC de dientes con PAC y de dientes sanos, en LPAs y ligamento
periodontal sano (LS).
Materiales y Métodos: Se seleccionaron pacientes con diagnóstico clínico de
PAC e indicación de endodoncia (n=31), a partir de los cuales se obtuvieron
muestras de FGC; pacientes con diagnóstico de PAC e indicación de extracción
(n=23), a partir de los cuales se obtuvieron muestras de FGC y/o de LPAs
correspondientes al mismo diente, y pacientes con indicación de exodoncia de premolares sanos por ortodoncia (n=27), a partir de los cuales se obtuvo LS. Se
determinó la concentración de proteínas totales (CPT) en las muestras de FGC.
Se midió actividad y niveles totales a todas las muestras mediante zimografía,
actividad basal y total de MMP-13 mediante ensayo de actividad “Fluorokine E”,
niveles de α2M en FGC mediante ELISA, formas enzimáticas en todas las
muestras mediante “immunowestern blot”. Se realizó el análisis estadístico a los
resultados obtenidos con el software Stata10.
Resultados: Se observó una CPT similar entre muestras de FGC provenientes
de dientes con PAC y sanos. Se identificaron las formas enzimáticas de las
MMPs -9, -2 y -13 en FGC de dientes con PAC y sanos, y en muestras de
homogeneizados, y se corroboró la correspondencia entre las bandas
inmunorreactivas identificadas por “immunowestern blot” y zimografía en
gelatina, identificadas como MMPs -9 y -2. No se observaron diferencias
significativas entre los niveles totales, de proformas, formas activas y razón de
activación de MMPs -9 y -2 en FGC mediante zimografía. En FGC de pacientes
con PAC se observó correlación negativa entre la forma activa de MMP-9 y la
forma activa de MMP-2 mientras que en FGC de sujetos sanos se observó
correlación negativa entre la proforma y la forma activa de la MMP-2. No se
observaron diferencias significativas en la actividad basal y total de MMP-13
entre FGC de dientes con PAC y sanos. Los niveles de α2m fueron similares
para ambos tipos de muestras. Los niveles totales, actividad de la proforma,
forma activa de MMP-9 y razón de activación de MMP-2 fueron significativamente mayores en LPAs en comparación con LS, mientras que no
hubo diferencias significativas entre los niveles totales, actividad de proforma y
forma activa de MMP-2, razón de activación de MMP-9 y actividad basal y total
de MMP-13 entre ambos tipos de muestras. No se observó correlación en la
actividad tanto de las proformas como de las formas activas de las MMPs en
estudio presentes en el FGC con las presentes en las LPAs. En relación a los
antecedentes clínicos, se observaron correlaciones positivas entre la edad y
proforma de la MMP-9 y forma activa de la MMP-2 en muestras de LS. En LPAs,
no se obtuvieron diferencias significativas de los niveles de los mediadores
estudiados entre los géneros mientras que, en LS, el género femenino presentó
mayores niveles de la proforma de la MMP-9 y de la forma activa de la MMP-2.
Los valores obtenidos para los mediadores en estudio no varían entre el grupo
completo de pacientes y el grupo de no fumadores. Se obtuvo una correlación
positiva entre el diámetro de las LPAs con las formas activas de MMPs -9 y -2.
Conclusiones: Las MMPs -9 y -2 tendrían un rol preponderante en la patogenia
de la PAC. A pesar de que en el presente trabajo la caracterización de los
mediadores en estudio en FGC no ha sido capaz de reflejar los cambios que
ocurren en las LPAs, futuros estudios deben considerar la influencia de esta
patología en la composición y actividad proteolítica de éste. Un conocimiento
más acabado de los mecanismos involucrados en la destrucción del periodonto
apical contribuirán al desarrollo de métodos diagnósticos, de tratamiento y
herramientas de seguimiento de uso rutinario. | |
