info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
Eecto in vitro de las endonucleasas de restricción extraídas de klebsiella pneumoniae sobre adn de plasmodium falciparum
Fecha
2009Autor
Becerra Gamboa, Jorge Víctor
Institución
Resumen
El presente trabajo tiene como objetivo principal determinar la actividad de la endonucleasa de restricción de Klebsiella pneumoniae sobre el DNA plasmídico de Plasmodium falciparum. Para esto se realizó la extracción de la enzima a través de técnicas de sonicación y cambio de medios en la cepa bacteriana. El método utilizado para la obtención de plásmido se denomina lisis alcalina y se basa en la desnaturalización selectiva del DNA cromosómico mediante alcalinización con NaOH y adición de SDS (detergente), en condiciones en las que el DNA plasmídico permanece próximo a su estructura nativa, debido principalmente a su pequeño tamaño y su naturaleza circular y superenrollada. Finalmente, la enzima y el DNA fueron incubados para que se de la digestión de este último y se realizó un corrido cromatográfico en gel de agarosa. Los resultados obtenidos nos mostraron una clara actividad de la enzima sobre el ácido nucleico del parásito, mostrando varios puntos de corte. Estos puntos de corte obtenidos son equivalentes a las veces que se encuentra repetido el lugar de restricción a lo largo del plásmido