Rol de la proteína CdeM de C. difficile en la unión de vitronectina, fibronectina, C3 y C1q y en la adherencia e internalización de las esporas de C. difficile a células epiteliales del intestino

Abstract

C. difficile es un organismo patógeno formador de esporas, las cuales son indispensables en el proceso de infección debido a que es fundamental para la transmisión, colonización, recurrencia y persistencia. La espora es capaz de interactuar directamente con el hospedero, adhiriéndose e internalizando en las células epiteliales por lo cual es necesario entender esta interacción patógeno-hospedero. Resultados anteriores de nuestro laboratorio han descrito que la espora de C. difficile es capaz de interactuar con su hospedero mediante la interacción con receptores específicos y además es capaz de unirse a proteínas del hospedero como vitronectina, fibronectina, C3 y C1q, utilizándolas como puentes moleculares para la adherencia e internalización de la espora. Resultados preliminares han sugerido, que la proteína CdeM de la exosporium de la espora de C. difficile podría ser responsable de la interacción entre la espora y fibronectina, vitronectina, C3 y C1q. Por esto se planteó el objetivo de caracterizar el rol de la proteína CdeM de la espora de C. difficile en la adherencia e internalización de la espora mediada por fibronectina, vitronectina, C3 y C1q. Para esto se obtuvieron cuerpos de inclusión de CdeM-6xHis con los cuales se realizó un Pulldown con suero humano y mediante Western blot e inmunofluorescencia se vio la unión de fibronectina, vitronectina, C3 y C1q a los cuerpos de inclusión. Posteriormente se realizó un ensayo de infección donde se cuantificó la adherencia e internalización. Se determinó que CdeM es capaz de unirse con vitronectina, C3 y C1q y no así con fibronectina. Además, se determinó que esta proteína es capaz de adherirse a la superficie celular e internalizar en las células Caco-2 lo cual sugiere un posible rol de CdeM en la adherencia e internalización de la espora de C. difficile en células epiteliales del intestino.