Dissertação
Efeito do Resveratrol na criopreservação de sêmen de garanhões da Raça Crioula
Effect of Resveratrol on cryopreservation of semen from Creole stallions
Registro en:
CARVALHO, Natan da Cruz de. Efeito do Resveratrol na criopreservação de sêmen de garanhões da Raça Crioula. 67p. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) – Universidade Federal do Pampa, Uruguaiana, 2020.
Autor
Carvalho, Natan da Cruz de
Institución
Resumen
The possibility of transporting genetic material over long distances makes the use of frozen
semen highly necessary for the equine industry, but the low fertility rates resulting from
cellular damage by processing limit its use. The factors that because damages are diverse,
among them, the production of reactive oxygen species (ROS) and oxidative stress stand out.
The addition of antioxidants in the diluent can decrease damages, preserving sperm
parameters and increasing the fertility of frozen semen. Resveratrol (RSV) is a polyphenol
derived from plants and has some biological properties, including antioxidant effect in several
systems. Thus, the aim of this study was to check the action of RSV added to the diluent for
freezing the semen of stallions of the Crioula breed on sperm viability and oxidative stress.
For this purpose, four Cioulos stallions, with known fertility, had semen collected three times
during the breeding season. The semen free of gel fraction was diluted and fractionation in
two aliquots, one frozen in Botucrio® diluent without any supplementation (control), and the
other in diluent supplemented with 10 μM RSV. After maintaining the semen in liquid
nitrogen, two straws from each group were thawed and subjected to evaluations of sperm
kinetics, longevity, morphology, plasma membrane integrity, acrosomal and mitochondrial
membrane potential, ROS production and total antioxidant potential. With this study, it we
concluded that the addition of 10 μM of RSV in freezing diluent did not influence the kinetic,
biochemical and functional parameters of thawed sperm from Crioulos stallions. Further
studies should be carried out to define oxidative stress profiles and adequate concentrations to preserve the quality of thawed semen. A possibilidade de transportar material genético por longas distâncias torna o uso de
sêmen congelado altamente necessário para a indústria equina, mas os baixos índices de
fertilidade decorrentes de danos celulares pelo processamento limitam sua utilização. Os
fatores que ocasionam estes danos são diversos, entre eles, destaca-se a produção de espécies
reativas de oxigênio (ERO) e o estresse oxidativo. A adição de antioxidantes no diluente pode
minimizar estes danos, preservando parâmetros espermáticos e incrementado a fertilidade do
sêmen congelado. O Resveratrol (RSV) é um polifenol derivado de plantas e apresenta
algumas propriedades biológicas, entre elas, o efeito antioxidante em diversos sistemas. Deste
modo, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a ação de RSV adicionado ao diluente para
congelamento de sêmen de garanhões da raça Crioula sobre a viabilidade espermática e o
estresse oxidativo. Para tal, doze ejaculados (n = quatro garanhões, três ejaculados cada),
coletados com vagina artificial, foram diluídos até a concentração de 50x106 sptz/mL e
fracionados em duas alíquotas. As alíquotas foram centrifugadas a 500G por 15min, o
sobrenadante descartado e os pellets ressuspendidos e ajustados na concentração de 200x106
sptz/mL com diluente de congelamento: Botucrio® sem suplementação (Controle), ou
suplementado com 10 μM RSV. Após a manutenção do sêmen em nitrogênio líquido, duas
palhetas de cada grupo foram descongeladas e submetidas a avaliações de cinética
espermática, longevidade, morfologia, integridade de membrana plasmática, acrossomal e
potencial de membrana mitocondrial, produção de ERO e potencial antioxidante total. Com
este estudo, conclui-se que a adição de 10 μM de RSV em diluente de congelamento não
influenciou nos parâmetros cinéticos, bioquímicos e funcionais de espermatozoides
descongelados de garanhões da raça Crioula. Mais estudos devem ser realizados para
definição de perfis de estresse oxidativo e concentrações adequadas para preservação da
qualidade do sêmen descongelado.