Tese
Permeação cutânea e vaginal de fármacos: rotas alternativas
Autor
Alves, Michele Campos
Institución
Resumen
In Chapter 1, the objective was to insert taxifoline (TAX) into a semi-solid dosage
form and to evaluate its ex vivo permeation in human skin. TAX was incorporated
into an oil-in-water emulsion. Analysis Method was developed and validated using
high performance liquid chromatography (HPLC) to active principle quantification
during the experiments and permeation through the human skin was conducted in
Franz-type cells. In the chromatographic method the following conditions were used:
octadecylsilane (C18) column; mobile phase consisting of water and acetonitrile
(45:55, v/v), acidified with 0.1 % formic acid (pH = 2,4); column compartment
temperature to 45 ° C; an isocratic flow system at 0,5 mL.min-1 and detection at 288
nm. The method was precise (CV<5 %), accurate (recovery between 98 % and 102
%), linear (R2>0,99), specific, and robust. Permeation experiment through human
skin presented permeated percentage equal to 48,09 % (per dose). The results
described suggest that, in the studied matrix, TAX may be able to permeate up to the
dermis and that, possibly, TAX achieved concentrations may be sufficient for the
same to exert its therapeutic effect systemically. In Chapter 2, the objective of the
study was to evaluate the feasibility of using formulations containing dienogest
(DNG), gestrinone (GTN), nimesulide (NMS) and piroxicam (PRX) for vaginal
administration in patients with pelvic pain associated with endometriosis. Intravaginal
creams were individually composed of active pharmaceutical ingredients
incorporated into Pentravan® base (0,2 % DNG, 0,5 % GTN, 2,0 % NMS and 2,0 %
PRX). Methods of quantification using HPLC were validated for the quantification of
active principles, vaginal permeation profiles were determined using porcine vaginal
mucosa in Franz type diffusion cells and kinetic parameters were determined.
Methods were precise (CV <5 %), exact (recovery between 98 % and 102 %), linear
(R2> 0,99) and specific. Diffusion experiments demonstrated fluxes of 15,98 μg.cm-
2.h-1 for DNG, 3,91 μg.cm-2.h-1 for PRX, 3,72 μg.cm-2.h-1 for GTN and 2,26 μg.cm-2.h-1
for NMS. Fluxes required to release the recommended daily dose for the treatment of
pelvic pain associated with endometriosis were calculated and established as 0,87
μg.cm-2.h-1 for DNG, 0,69 μg.cm-2.h-1 for GTN, 70,45 μg.cm-2.h-1 for NMS and 9,64
μg.cm-2.h-1 for PRX. DNG and GTN had permeation fluxes and quantities of drug
absorbed hypothetically compatible with therapeutic effect in vivo, whereas NMS and
PRX studies showed a great amount of these drugs retained in the vaginal mucosa
which could explain a local effect for these two substances. The results suggest that
the matrix evaluated appears to be a viable intravaginal vehicle for the systemic
therapeutic use of DNG and GTN. However, NMS and PRX demonstrated the
possibility of use for an effect on the local tissue. Further studies should be
performed in the formulation for systemic therapeutic use of NMS and PRX. No capítulo primeiro, objetivou-se inserir a taxifolina (TAX) em uma forma de
dosagem semissólida e avaliar a sua permeação ex vivo em pele humana. A TAX foi
incorporada em uma emulsão de óleo em água. Um método de análise foi
desenvolvido e validado utilizando cromatografia em fase líquida de alta eficiência
(CLAE) para realizar a quantificação do princípio ativo durante os experimentos e a
permeação através da pele humana foi conduzida em células do tipo Franz. No
método cromatográfico, foram utilizadas as seguintes condições: coluna
octadecilsilano (C18); fase móvel composta por água e acetonitrila (45:55, v/v),
acidificada com 0,1 % de ácido fórmico (pH=2,4); temperatura do compartimento
para a coluna de 45 °C; um sistema de fluxo isocrático a 0,5 mL.min-1 e detecção a
288 nm. O método foi preciso (CV<5 %), exato (recuperação entre 98 % e 102 %),
linear (R2>0,99), específico e robusto. O experimento de permeação através da pele
humana apresentou porcentagem permeada igual a 48,09 % (por dose). Os
resultados descritos sugerem que, na matriz estudada, a TAX é capaz de permear
até a derme e que, possivelmente, as concentrações alcançadas de TAX possam
ser suficientes para que a mesma exerça o seu efeito terapêutico de forma
sistêmica. No capítulo segundo, o objetivo do estudo foi avaliar a viabilidade de
utilizar formulações contendo dienogeste (DNG), gestrinona (GTN), nimesulida
(NMS) e piroxicam (PRX) para a administração vaginal em pacientes com dor
pélvica associada à endometriose (DPAE). Os cremes intravaginais foram
compostos individualmente por ingredientes farmacêuticos ativos incorporados em
base Pentravan® (DNG a 0,2 %, GTN a 0,5 %, NMS a 2,0 % e PRX a 2,0 %).
Métodos de quantificação utilizando CLAE foram validados para a quantificação dos
princípios ativos, perfis de permeação vaginal foram determinados usando mucosa
vaginal porcina em células de difusão do tipo Franz e os parâmetros cinéticos foram
determinados. Os métodos foram precisos (CV<5 %), exatos (recuperação entre 98
% e 102 %), lineares (R2>0,99) e específicos. Os experimentos de difusão
demonstraram fluxos de 15,98 μg.cm-2.h-1 para DNG, 3,91 μg.cm-2.h-1 para PRX,
3,72 μg.cm-2.h-1 para GTN e 2,26 μg.cm-2.h-1 para NMS. Os fluxos necessários para
liberar a dose diária recomendada para o tratamento da DPAE foram calculados e
estabelecidos como 0,87 μg.cm-2.h-1 para DNG, 0,69 μg.cm-2.h-1 para GTN, 70,45
μg.cm-2.h-1 para NMS e 9,64 μg.cm-2.h-1 para PRX. DNG e GTN apresentaram fluxos
de permeação e quantidades absorvidas hipoteticamente compatíveis com o efeito
terapêutico in vivo, enquanto os estudos com NMS e PRX mostraram uma grande
quantidade desses fármacos retida na mucosa vaginal, o que poderia explicar um
efeito local para essas duas substâncias. Os resultados sugerem que a matriz
avaliada parece ser um veículo intravaginal viável para o uso terapêutico sistêmico
de DNG e GTN. Entretanto, NMS e PRX demonstraram a possibilidade de uso para
um efeito no tecido local. Estudos adicionais devem ser realizados na formulação
para que haja o uso terapêutico sistêmico de NMS e PRX.