Dissertação
Papel de fatores solúveis associados à obesidade na ativação macrofágica durante infecção por Trypanosoma cruzi
Autor
Marangon, Marco Antonio
Institución
Resumen
Obesity represents a worrying picture in the world public health with increasing numbers in
various sectors of society. In Brazil the numbers are worrying, in 2014 the rates of overweight
and obesity were at 52% and 17%, respectively. Obesity is characterized as metabolic
syndrome and a low-grade inflammatory process known as meta-inflammation. Macrophage
activation by adipocyte-secreted soluble factors (FSA) is important in the differentiation of
monocytes into characteristic adipose tissue macrophages. Moreover, a change in polarization
of macrophages from M2 profile to M1 profile is observable characteristics during obesity.
Metabolic dysfunctions are directly related to pro-inflammatory cytokine production and although
the impact of obesity on metabolic and cardiovascular diseases is well known, its role in
immune system activation during the course of infectious diseases is poorly understood.
Several diseases may be compromised by the modulation of factors associated with obesity,
including Chagas disease. This disease is a neglected zoonosis for reaching low-class sectors
of little public interest. It is an endemic disease in Latin America, but it is present in northern
hemispheric countries due to factors such as the migratory process, transfusions, among
others. Thus, this paper aims to draw a correlation between FSA and macrophage activation
during Trypanosoma cruzi infection. Also, understand how FSAs may or may not contribute to
the progression of Chagas disease. Focusing on lipid metabolism modulation, cytokine
production and expression of M1 and M2. macrophage profile markers In this study we
differentiated NIH3T3-L1 cells into adipocytes and used the supernatant obtained from them to
stimulate peritoneal macrophages infected or not with Trypanosoma cruzi. The results showed
that Trypanosoma cruzi infection induces higher biogenesis of lipid body at 24, 48 and 72 hours
and was potentiated in the presence of FSA. Infection induced increase in IL-10 cytokine
production at 24, 48 and 72 hours only in the presence of FSA. For TNFα cytokine, there was
an increase in infected groups, an effect that was not modulated by the presence of FSA,
whereas cytokine KC increased in infected groups and was modulated by FSA only within 24h.
In addition, we found that the infection-induced an increase in nitric oxide (NO) production
observed by the increase of nitrite production by activated macrophages and that this increase
was modulated by FSA only within 24 hours. Infection also induced PPARγ expression at 24, 48
and 72 hours and was modulated by FSA at 72h. Thus our results suggest a modulating role of
adipocyte-secreted factors in macrophage activation, attributed to increased lipid body
biogenesis, PPARγ expression, cytokine syntheses such as TNF-α and KC and negative
modulation of IL-10 production during Trypanosoma cruzi infection in vitro. A obesidade representa um quadro preocupante na saúde pública mundial com números cada
vez mais crescente nos diversos setores da sociedade.No Brasil os números são
preocupantes, em 2014 os índices de sobrepeso e obesidade estavam em 52% e 17%,
respectivamente. A obesidade é caracterizada como síndrome metabólica e um processo
inflamatório de baixo grau conhecido como metainflamação. A ativação macrofágica por fatores
solúveis secretados por adipócitos (FSA), são importantes na diferenciação de monócitos em
macrófagos característicos do tecido adiposo. Além disso, uma mudança na polarização de
macrófagos de perfil M2 para perfil M1, são características observáveis durante a obesidade.
As disfunções metabólicas estão diretamente relacionadas com produção de citocinas proinflamatórias
e apesar do impacto da obesidade em doenças metabólicas e cardiovasculares
serem bem conhecidos, seu papel nas funções na ativação do sistema imune durante o curso
de doenças infecciosas é pouco compreendido. Várias doenças podem ser comprometidas
pela modulação de fatores associados a obesidade, entre elas a Doença de Chagas. Esta
doença é uma zoonose negligenciada por atingir setores da classe baixa e de pouco interesse
público. Trata-se de uma doença endêmica da América latina, mas apresenta-se em países do
hemisférico norte devido a fatores como processo migratório, transfusões entre outros. Assim,
este trabalho tem como objetivo traçar uma correlação entre FSA e a ativação de macrofágica
durante a infecção porTrypanosoma cruzi. Além disso, entender como os FSA podem ou não
contribuir para a progressão da Doença de Chagas. Com foco na modulação do metabolismo
lipídico, produção de citocinas e expressão de marcadores de perfil macrofágico M1 e
M2.Neste estudo diferencianciamos células NIH3T3-L1 em adipócitos e utilizamos o
sobrenadante obtido a partir delas para estimular macrófagos peritoneais infectados ou não
com Trypanosoma cruzi.Os resultados demostraram que a infecção por Trypanosoma cruzi
induz uma maior biogênese de corpúsculos lipídicos nos tempos de 24, 48 e 72 horas e que foi
potencializado na presença de FSA. A infecção induziu aumento na produção da citocina IL-10
nos tempos de 24, 48 e 72 horas apenas na presença de FSA. Para citocina TNFα, houve um
aumento nos grupos infectados, efeito que não foi modulado pela presença de FSA, enquanto
que a citocina KC apresentou um aumentou nos grupos infectados e foi modulado pelos FSA
somente no tempo de 24h. Além disso, verificamos que a infecção induziu um aumento da
produção de óxido nítrico (NO) observado pelo aumento da produção de nitrito por macrófagos
ativados e que esse aumento foi modulado pelos FSA somente no tempo de 24 horas. A
infecção também induziu a expressão de PPARγ nos tempos de 24, 48 e 72 horas e foi
modulado pelos FSA no tempo de 72h.. Dessa forma nossos resultados sugerem um papel
modulador dos fatores secretados por adipócitos na ativação de macrófagos, atribuídos ao
aumento da biogênese de corpúsculos lipídicos, expressão de PPARγ, síntese de citocinas
como TNF-α e KC e uma modulação negativa da produção de IL-10 durante a infecção por
Trypanosoma cruzi in vitro.