Dissertação
Membranas bioativas de colágeno contendo crisina em lipossomas reduz a inflamação e promove melhora na angiogênese e cicatrização de feridas cutâneas
Registro en:
CARVALHO, Mikaella Tuanny Bezerra. Membranas bioativas de colágeno contendo crisina em lipossomas reduz a inflamação e promove melhora na angiogênese e cicatrização de feridas cutâneas. 2020. 118 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) - Universidade Federal de Sergipe, Aracaju, 2020.
Autor
Carvalho, Mikaella Tuanny Bezerra
Institución
Resumen
The effectiveness of pharmacological therapy for the treatment of wounds is variable, as
well as its side effects, which drives the search for new therapeutic modalities, among them
products based on medicinal plants and nanotechnology. Chrysin, a flavonoid found in several
plant species, has pharmacological properties such as: antioxidants, anti-inflammatories,
antimicrobials, antibacterials and antiallergic agents that can contribute to an adequate scar
repair. In this way, the work aimed to evaluate the effects of bioactive collagen membranes
containing chrysin in liposomes on the healing of skin wounds in an animal model of
excisional skin wounds. 72 rats (Wistar) and 18 male mice (Swiss) were used, submitted to a
cutaneous excision and randomized in the groups according to treatment: without intervention
- (SI); control - collagen membrane containing liposomes (COL) and collagen membrane
containing chrysin in liposomes (COL / CRI) - patent filed with INPI BR 10 2019 018341 1.
The experimental protocols were approved by CEPA / UFS (55/2018). Wound areas were
measured using an 8 mm diameter digital caliper on the 3rd, 7th, 14th and 21st day postinjury
and histologically evaluated (hematoxylin-eosin stain) for response and type of
inflammatory infiltrate, granulation tissue, proliferation fibroblasts, deposition of collagen
fibers and re-epithelialization in the healing area. The effect of membranes containing chrysin
was evaluated for vascular endothelial growth factor (VEGF) and kappa nuclear factor B
(NFkB) by Western blot, interleukins IL-1β and IL-6 by ELISA and SOD and CAT by the
colorimetric method. Differences between groups were analyzed using the one-way ANOVA
test, followed by the Tukey post-test. The results were expressed as mean ± E.P.M. and
considered significant when p <0.05. The chrysin content in the membranes was 165.37 ±
11.70 μg · cm-2, obtaining an encapsulation efficiency of 87.82%. In the analysis of the
wound reduction area, the animals treated with COL / CRI significantly increased the
percentage of wound reduction on the 3rd day when compared to the SI group (p <0.05) and
on the 7th day when compared to the SI groups (p <0.001) and COL (p <0.01). In assessing
the intensity of the inflammatory reaction, COL / CRI decreased the inflammatory profile on
the 3rd and 7th day when compared to the SI (p <0.001) and COL (p <0.01) groups,
respectively. In histomorphological analysis, COL / CRI significantly increased the rates of
epithelialization of residual wounds on the 3rd day when compared to the SI (p <0.001) and
COL (p <0.05) groups and on the 7th day when compared to the SI groups (p <0.001) and
COL (p <0.01). In the assessment of inflammatory activity on the 7th post-injury day, the
COL / CRI group significantly decreased NFkB levels when compared to the SI group (p
<0.05) and the levels of interleukins IL-1β and IL-6 ( p <0.001) when compared to the SI
group (p <0.001). On the 7th post-injury day, COL / CRI significantly increased VEGF levels
when compared to the SI (p <0.01) and COL (p <0.001) group. In the antioxidant evaluation
on the 7th day after injury, COL / CRI significantly increased SOD levels when compared to
the SI group (p <0.05) and CAT when compared to the SI group (p <0.001). It is concluded,
therefore, that the membranes containing chrysin have antioxidant, anti-inflammatory,
angiogenic and healing actions representing a promising biotechnological alternative with
clinical application for the treatment of wounds. A eficácia da terapia farmacológica para o tratamento das feridas é variável, assim como seus
efeitos colaterais, o que impulsiona a busca por novas modalidades terapêuticas, dentre elas os
produtos com base em plantas medicinais e nanotecnologia. A crisina, um flavonoide
encontrado em várias espécies de plantas apresenta propriedades farmacológicas tais como:
antioxidantes, anti-inflamatórias, antimicrobianas, antibacterianas e antialérgicas que podem
contribuir para um adequado reparo cicatricial. Desta forma, o trabalho objetivou avaliar os
efeitos das membranas bioativas de colágeno contendo crisina em lipossomas sobre a
cicatrização de feridas cutâneas em modelo animal de ferida cutânea excisional. Foram
utilizados 72 Ratos (Wistar) e 18 camundongos (Swiss) machos, submetidos a uma excisão
cutânea e randomizados nos grupos conforme tratamento: sem intervenção - (SI); controle -
membrana de colágeno contendo lipossomas (COL) e membrana de colágeno contendo
crisina em lipossomas (COL/CRI) – patente requerida junto ao INPI BR 10 2019 018341 1.
Os protocolos experimentais foram aprovados pelo CEPA/UFS (55/2018). As áreas das
feridas foram mensuradas através do paquímetro digital de 8 mm de diâmetro no 3º, 7º, 14º e
21º dia pós-lesão e avaliadas histologicamente (coloração hematoxilina-eosina) quanto à
resposta e tipo de infiltrado inflamatório, tecido de granulação, proliferação de fibroblastos,
deposição de fibras colágenas e reepitelização na área de cicatrização. O efeito das
membranas contendo crisina foi avaliado quanto ao fator de crescimento endotelial vascular
(VEGF) e fator nuclear kappa B (NFB) por Western blot, interleucinas IL-1β e IL-6 por
ELISA e SOD e CAT pelo método colorimétrico. As diferenças entre os grupos foram
analisadas por meio do teste ANOVA, uma via, seguido pelo pós- teste de Tukey. Os
resultados foram expressos como média ± E.P.M. e considerados significativos quando
p<0,05. O teor da crisina nas membranas foi de 165,37 ± 11,70 μg·cm-2, obtendo eficiência de
encapsulação de 87,82%. Na análise da área de redução das feridas, os animais tratados com
COL/CRI aumentaram significativamente o percentual de redução das feridas no 3º dia
quando comparado ao grupo SI (p<0,05) e no 7º dia quando comparado aos grupos SI
(p<0,001) e COL (p<0,01). Na avaliação da intensidade da reação inflamatória, COL/CRI
diminuiu o perfil inflamatório no 3º e 7º dia quando comparado aos grupos SI (p<0,001) e
COL (p<0,01) respectivamente. Na análise histomorfológica, COL/CRI aumentou
significativamente as taxas de epitelização das feridas residuais no 3º dia quando com
comparado aos grupos SI (p<0,001) e COL (p<0,05) e no 7º dia quando comparado aos
grupos SI (p<0,001) e COL (p<0,01). Na avaliação da atividade inflamatória no 7º dia póslesão,
o grupo COL/CRI diminuiu significativamente os níveis do NFB quando comparado
ao grupo SI (p<0,05) e os níveis das interleucinas IL-1β e IL-6 (p<0,001) quando comparado
ao grupo SI (p<0,001). No 7º dia pós- lesão, COL/CRI aumentou significativamente os níveis
de VEGF quando comparado ao grupo SI (p<0,01) e COL (p<0,001). Na avaliação
antioxidante no 7º dia pós- lesão, COL/CRI aumentou significativamente os níveis de SOD
quando comparado ao grupo SI (p<0,05) e CAT quando comparado ao grupo SI (p<0,001).
Conclui-se, assim, que as membranas contendo crisina apresentam ações antioxidantes, antiinflamatórias,
angiogênicas e cicatrizantes representando uma alternativa biotecnológica
promissora com aplicação clínica para o tratamento de feridas. Aracaju