Dissertação
Reatividade de anticorpos IgE a antígenos glicosilados derivados de Dermatophagoides farinae em pacientes atópicos
Registro en:
YNOUE, Leandro Hideki. Reatividade de anticorpos IgE a antígenos glicosilados
derivados de Dermatophagoides farinae em
pacientes atópicos. 2006. 75 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2006.
Autor
Ynoue, Leandro Hideki
Institución
Resumen
Background: Components from species of mites found in the house dust
showed an important role in respiratory diseases. Many of these components
are glycosylated and some lectins, like Concanavalin A (ConA) showed an
affinity to those molecules.
Objectives: To determine the levels of speific IgE to Df crude extract and Df-
ConA bound fraction in allergic patients and their cross-reaction between D.
pteronyssinus and B. tropicalis crude extracts by ELISA and Inhibition ELISA,
respectively. The presence of allergic components in Df crude extract and Df-
ConA bound reactive to IgE by Immunoblot also was verified.
Methods: Concanavalin A affinity chromatography was used to obtain
glycosylated fraction with α-D-mannose and β-D-glucose residues from
Dermatophagoides farinae (Df) crude extract. ConA-unbound and ConA-bound
fractions and also Df crude extract were used to evaluate IgE reactivity by
ELISA and Immunoblot in sera from 41 mite-sensitive patients with allergic
rhinitis history and 31 non-allergic subjects selected by skin prick test.
Results: All allergic patients were positive SPT to D. farinae and D.
pteronyssinus, and 93% of co-positivity to B. tropicalis. ELISA showed a great
positivity in all extracts, but higher levels of IgE were found in Df crude extract
and ConA-unbound fractions when comparing with ConA-bound fraction.
However, both ConA-unbound and ConA-bound fractions showed a significant
positive correlation with Df crude extract. Inhibition ELISA assay showed a high
cross-reactivity between Dermatophagoides farinae and Dermatophagoides
pteronyssinus extracts. High frequency IgE reactivity to apparently high
molecular bands in the ConA-bound fraction was observed by Immunoblot
analysis.
Conclusion: Dermatophagoides farinae represent an important source of
glycosylated allergens with Concanavalin A affinity which are involved in the
mechanisms of IgE induction in allergic rhinitis. Mestre em Imunologia e Parasitologia Aplicadas Introdução: Os componentes de espécies de ácaro encontrados na
poeira de casas mostraram um importante papel nas doenças
respiratórias. Muitos desses componentes são glicosilados e algumas lectinas,
como a Concanavalina A (ConA) mostraram afinidade à aquelas moléculas..
Objetivos: Determinar os níveis de IgE específica ao extrato Df total à fração
Df-ConA em pacientes alérgicos e sua reatividade cruzada entre os extratos
brutos de D. pteronyssinus e B. tropicalis por ELISA e ELISA.de inibição
respectivamente. A presença de componentes alergênicos no extrato Df total e
na fração Df-ConA reativos à IgE por Immunoblot também foi verificada.
Material e Métodos: A cromatografia de afinidade em coluna de afinidade
ConA-Sepharose foi usada para obter frações gilcosiladas com resíduos de α-
D-manose and β-D-glicose do extrato bruto de Dermatophagoides farinae (Df
total). As frações Df-nConA e Df-ConA e também o extrato Df total foi usado
para avaliar a reatividade de IgE por ELISA e Immunoblot e soro de 41
pacientes com histórico de rinite alérgica e sensíveis ao ácaro e 31 indivíduos
não alérgicos selecionados pelo Teste Cutâneo de Puntura.
Resultados: Todos os pacientes foram positivos ao D. farinae e D.
pteronyssinus, e 93% de co-positividade à B. tropicalis. O ELISA mostrou uma
grande positividade em todos os extratos, mas níveis mais altos de IgE foram
encontrados no extrato Df total e na fração Df-nConA quando comparados à
fração Df-ConA. Entretanto, ambas as frações Df-nConA e Df-ConA,
mostraram uma correlação positiva com o extrato Df. O ELISA de inibição
mostrou uma alta reação cruzada entre os extratos de Dermatophagoides
farinae e Dermatophagoides pteronyssinus. Alta freqüência de IgE reativa a
bandas de alta massa molecular aparente na fração Df-ConA foram
observadas pelo Immunoblot.
Conclusão: Dermatophagoides farinae representa uma importante fonte de
alérgenos glicosilados com afinidade a Concanavalia A, os quais estão
envolvidos nos mecanismos de indução da IgE na rinite alérgica.
Palavras-Chave: Rinite alérgica, Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides
pteronyssinus, Blomia tropicalis, Concanavalina A, Reatividade cruzada,
Glicoconjugados.
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