Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação)Fosfolipases A2 (PLA2 EC 3.1.1.4) são enzimas que catalisam especificamente a hidrólise de fosfolipídios na ligação éster do carbono 2, liberando lisofosfolipídios e ácidos graxos, em unma reação dependente de cálcio. nesse trabalho, uma fosfolipase A2 ácida, denominada BmooPLA2, foi purificada a partir da peçonha da serpente Bothrops moojeni com uma combinação de cromatografia em gel de troca iônica (DEAE Sephacel), gel filtração (sephadex-G75) e gel de interação hidrofóbica (Phenyl Sepharose CL-4B). A eletroforese em gel de poliacrilamida, sob condições redutoras (SDS-PAGE), corada com coomassie brilhante blue, revelou uma única banda protéica com peso molecular aparente de 15.500. A atividade PLA2 foi determinada pela titulação potenciométrica em emulsão de gema de ovo em presença de disoxicolato de sódio 0,03M e 0,1mL de CaCl2. A atividade hemolítica indireta foi realizada em gel de agarose, utilizando gema de ovo e eritrócitos humanos como substrato.. BmooPLA2 apresentou uma atividade hemolítica indireta mínima a uma concentração de 1μg. A fosfolipase BmooPLA2 demonstrou ser estável em diferentes temperaturas (-20 a 100°C) e pHs (entre 2,5 e 10), não demonstrou dependência a nenhum íon catiônico (Mg²+, Zn²+, Co²+, Na²+, Mn²+ e Fe²+) e foi inibida totalmente com EDTA a partir de uma concentração de 30mM. A enzima BmooPLA2 também apresentou uma elevada atividade edematogênica, quando injetada em patas de ratos e uma moderada miotoxicidade, quando ensaiada com o kit de creatina quinase. Neste trabalho, foi purificada e caracterizada parcialmente uma fosfolipase A2 ácida (BmooPLA2) da peçonha da serpente Bothrops moojeni.