| dc.description | O teste ELISA tem sido utilizado para investigar a presença de imunoglobulinas no soro contra larvas de Strongyloides stercoralis. Entretanto, uma das principais limitações encontradas na padronização de testes sorológicos mais sensíveis e específicos é a dificuldade em se obter quantidade suficiente de antígenos homólogos que permitam seu posterior fracionamento e análise. Este trabalho teve como objetivos determinar níveis de IgE específica e total por ELISA em amostras de soros, utilizando como antígeno heterólogo larvas filarióides de S. ratti para o
diagnóstico da estrongiloidíase humana. Amostras de soros de 120 indivíduos foram analisadas, sendo 40 pacientes que eliminavam larvas de S. stercoralis nas fezes (grupo I), 40 pacientes com outras parasitoses, triados pelo Laboratório de Análises Clínicas do Hospital de Clínicas da UFU- MG (grupo II) e 40 indivíduos sadios, estudantes universitários, parasitologicamente negativos pelos métodos de Baermann—Moraes e Hoffmann, Pons e Janer em três amostras fecais (grupo 111). S. ratti foi obtido de cultura de fezes de Rattus rattus infectados experimentalmente. Microplacas para ELISA foram sensibilizadas com 0,5ug/poço de extrato salino de S. ratti. Amostras de soro foram utilizadas na diluição de 12 em duplicata e o anticorpo secundário anti-IgE humana-biotinilado & 1:1000. O conjugado consistiu de estreptavidina—peroxidase a 1:1000 e a revelação com ABTS e H202. Resultados foram expressos em Índices ELISA (IE), considerando valor de cut 017 = 100. ELISA para IgE total utilizou anticorpo monoclonal de captura anti-IgE humana (1:5000), soros nas diluições de 1:5, 1:25 e 1:125, o conjugado estreptavidina—peroxidase(l:4000) e as etapas subsequentes foram as mesmas para ELISA—IgE específica. Resultados foram expressos em U/ml (limiar de normalidade = 100 U/ml). A média geométrica (mg.) dos níveis de IgE específica a S. stercoralis obtidos por ELISA foi significativamente maior no grupo I (IE 143 p < 0,05) do que nos
grupos II (IE 70) e III (IE 76), apresentando assim positividade de 55% (22/40) nos pacientes com
exame parasitológico positivo, apenas 2,5% (1/40) nos pacientes com outras parasitoses e 17,5% (7/40) nos indivíduos sadios. Níveis de IgE total foram significativamente maiores para o grupo 1
(mg. 866 U/ml, p<0,05) em relação aos grupos II e III (302 e 313 U/ml, respectivamente). Por outro lado, a positividade não revelou diferenças estatisticamente significativas nos três grupos (77,5%, 67,5% e 70%, respectivamente). Houve significante correlação positiva entre os níveis de IgE específica a S. stercoralis nos pacientes do grupo I e IgE total. Concluiu-seque não houve diferença significativa na positividade de IgE total entre os diferentes grupos estudados, apesar de se ter encontrado níveis maiores no grupo de pacientes com presença de larvas de S. stercoralis. Por outro lado, os níveis de IgE específica bem como a positividade no grupo de pacientes positivos para S. stercoralis foram bem superiores aos dos grupos com outras parasitoses ou de indivíduos sadios.
Portanto, acredita-se que o teste ELISA para IgE específica possa ter valor como auxílio ao diagnóstico e monitoramento da resposta imune da estrongiloidíase humana. Este trabalho vem descrever de forma pioneira a utilização de antígeno heterólogo para detecção de IgE específica a S. stercoralis por ELISA. | |
