Dissertação
Papel de MIF (Fator de Inibição de Migração de Macrófagos) na proteção de células trofoblásticas (BeWo) e explantes de terceiro trimestre contra infecção por Toxoplasma gondii
Registro en:
GOMES, Angelica de Oliveira. Papel de MIF (Fator de Inibição de Migração de Macrófagos) na proteção de células trofoblásticas (BeWo) e explantes de terceiro trimestre contra infecção por Toxoplasma gondii. 2008. 81 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2008.
Autor
Gomes, Angelica de Oliveira
Institución
Resumen
Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF) performs various roles. It s immunological
functions include the modulation of the host response to pathogens. In contrast to other known
cytokines, MIF production is induced rather than suppressed by glucocorticoids, and MIF has
been found to override the immunosuppressive effects of glucocorticoids. The aim of this
study was to verify the role of MIF on the defense of trophoblastic cells (BeWo) like a
experimental model of first trimester of pregnancy and placental explants of third trimester
against infection by Toxoplasma gondii. For this purpose, BeWo cells were incubated in
culture medium treated or not with STAg, rMIF, anti-MIF, supernatants of cultured cells
(SPN) pre stimulated for MIF production, or SPN plus anti-MIF. Followed by infection or
sham-infection with T. gondii the cells were again incubated in the presence of the same
stimulus. Supernatants of BeWo cells were assessed for MIF production. BeWo cells were
processed to measure replication of parasites and index of infection and for
immunocitochemistry assay. In addition, placental explants were stimulated or not with STAg
and infected or not with T. gondii. Explants were processed for morphologic and
immunohistochesmistry analyses and supernatants were accessed for MIF production. Results
showed that MIF is increased in supernatants of cultured BeWo cells infected with T. gondii
or stimulated with STAg compared with non infected cells. However, it wasn´t observed for
placental explants. The index of infection and replication of parasites increased with blockade
of endogenous MIF and reduced in presence of exogenous MIF in BeWo cells. Thus, we
conclude that MIF is an important factor in control of T. gondii infection in BeWo
trophoblastics cells. The lack up regulation of MIF by infection in third trimester placental
explants may have relationship with the more susceptible to infection at this gestational age. Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Mestre em Imunologia e Parasitologia Aplicadas O Fator de Inibição de Migração de Macrófagos (MIF) desempenha inúmeras funções
no organismo. Suas funções imunológicas incluem a modulação da resposta de
hospedeiros a patógenos. Diferente de outras citocinas, MIF é induzida na presença
de glicocorticóides, vencendo a atividade imunossupressora destes hormônios. O
objetivo deste estudo foi verificar a função de MIF na proteção de células
trofoblásticas (BeWo) como modelo experimental de primeiro trimestre de gestação
e explantes placentários de terceiro trimestre contra infecção por Toxoplasma gondii.
Para este propósito células BeWo foram incubadas em meio de cultura tratados ou
não com antígeno solúvel de T. gondii (STAg), rMIF, anticorpo policlonal anti-MIF,
sobrenadantes de cultura celular (SPN), ou SPN adicionado de anti-MIF.
Posteriormente, as células foram infectadas ou não por T. gondii e incubadas
novamente com os mesmos estímulos. Sobrenadantes de cultura de células BeWo
foram utilizados para dosagem da produção de MIF por ensaio ELISA. Células BeWo
foram fixadas e coradas para determinar a replicação de parasitos e o índice de
infecção. Além disso, explantes de placentas foram coletados, estimulados ou não
com STAg e infectados ou não com T. gondii. Os explantes foram processados para a
análise morfológica, Imuno-histoquímica e sobrenadantes foram analisados por
ELISA para quantificar a produção de MIF. Resultados mostraram que a produção
de MIF foi aumentada em sobrenadantes de células BeWo estimuladas com STAg e
em células infectadas com T. gondii em comparação com células não infectadas.
Entretanto, estes resultados não foram observados em explantes de placenta de
terceiro trimestre. O índice de infecção e replicação de T. gondii em células BeWo
aumentou com o bloqueio de MIF endógeno e diminuiu na presença de MIF
exógeno. Então, nós concluímos que MIF é um importante fator no controle da
infecção por T. gondii em células trofoblásticas de linhagem BeWo. E que a ausência
de regulação positiva de MIF frente à infecção em explantes de terceiro trimestre
pode ter relação com a maior suscetibilidade à infecção nesta fase gestacional.