Tese
Resposta imune intestinal de camundongos geneticamente deficientes em complexo de histocompatibilidade principal (MHC classe I ou II) infectados por Strongyloides venezuelensis
Registro en:
RODRIGUES, Rosângela Maria. Resposta imune intestinal de camundongos geneticamente deficientes em complexo de histocompatibilidade principal (MHC classe I ou II) infectados por Strongyloides venezuelensis. 2008. 85 f. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2008.
Autor
Rodrigues, Rosângela Maria
Institución
Resumen
In rodents and in humans, Strongyloides sp. infection induces an immune response
characterized by tissue eosinophils, mastocytosis, production of Th2 cytokines and
antibodies. Accordingly, in this study, we investigated the immune response against
Strongyloides venzuelensis infection in major histocompatibility complex (MHC) class I
or class II deficient mice. Wild-type C57BL/6 (WT), MHC I-/- and MHC II-/- mice were
individually inoculated with 3.000 larvae (L3) de S. venezuelensis and sacrificed on 50,
80, 130 and 210 days post-infection (p.i.). The infectivity rate was determined by eggs/g
of feces counted, number of adult worms recovered from small intestine and fecundity
rate. The samples of small intestine were routinely processed an stained with
hematolxilin-eosin, toluidin blue and PAS-alcian blue for identification of eosinophils,
mast cells and globets cells respectively. Levels of IL-4, IL-5, IL-12 e IFN-γ were
quantified in homogenates from the small intestine and sera by ELISA. Levels of
Strongyloides-specific IgM, IgA, IgE, IgG total, IgG1 e IgG2a were quantified in sera
of mice infected with S. venezuelensis and in non-infected animals by ELISA. Blood
samples were collected for total blood cell and differential counts. Samples of blood and
small intestine were collected. It was demonstrated that MHC II-/- animals are more
susceptible to Strongyloides infection by presenting elevated number of eggs recovered
in the feces and delay in elimination of adult worms when compared to WT and
MHC I-/- mice. Histopathological analysis revealed that MHC II-/- had a mild
inflammatory infiltration in the small intestine with reduction in tissue eosinophilia mast
cells and globets cell. These mice also presented significantly low numbers of
eosinophils and mononuclear cells in the blood, together with reduced Th2 cytokines in
small intestine homogenates and sera when compared to WT and MHC I-/- animals.
Additionally, parasite-specific IgM, IgA, IgE, total IgG and IgG1 were also
significantly lowered in the sera of MHC II-/- infected mice, while a discrete increase in
the levels of IgG2a could be observed in comparison to WT or MHC I-/- infected mice.
Altogether, these data demonstrated that expression of MHC class II but not class I
molecule is required to induce a predominant Th2 response and efficient control of S.
venezuelensis infection. These results provided evidences for the mechanisms involved
in the development of systemic disseminated and potentially fatal forms of
strongyloidiasis in immunocompromised hosts. Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais Doutor em Imunologia e Parasitologia Aplicadas A infecção por Strongyloides sp. induz resposta imune caracterizada por eosinofilia
tecidual, mastocitose, produção de citocinas Th2 e anticorpos, tanto em roedores como
em humanos. O objetivo desse estudo foi investigar a resposta imune contra a infecção
por Strongyloides venezuelensis em camundongos geneticamente deficientes em
complexo de histocompatibilidade principal (MHC) de classe I ou de classe II.
Camundongos C57BL/6 (WT), MHC I-/- e MHC II-/- foram subcutaneamente inoculados
com 3000 larvas (L3) de S. venezuelensis e sacrificados no 50, 80, 130 e 210 dias pósinfecção
(p.i.). A taxa de infectividade foi estimada pela contagem de ovos/g/fezes,
número de fêmeas recolhidas do intestino e taxa de fecundidade. Amostras do intestino
delgado foram rotineiramente processadas e coradas com hematoxilina eosina, azul de
toluidina e PAS-azul de alciano para identificação de eosinófilos, mastócitos e células
caliciformes, respectivamente. Níveis de IL-4, IL-5, IL-12 e IFN-γ foram quantificados
nos homogeneizados do intestino delgado e no soro dos camundongos infectados e não
infectados por ELISA. Níveis de IgM, IgA, IgE, IgG total, IgG1 e IgG2a anti-
Strongyloides foram quantificados no soro dos camundongos infectados e dos não
infectados por ELISA. Amostras de sangue foram colhidas para realizar a contagem
global e diferencial dos leucócitos. Os camundongos MHC II -/- foram mais susceptíveis
a infecção por apresentar elevado número de ovos eliminados nas fezes e retardo na
eliminação dos vermes adultos quando comparado aos camundongos selvagens (WT) e
MHC I-/-. Analise histopatológica revelou a presença de infiltrado inflamatório leve no
intestino delgado dos camundongos MHC II-/- com redução da eosinofilia tecidual,
mastócitos e células caliciformes. Esses camundongos apresentaram também o número
de eosinófilos e células mononucleares no sangue, significativamente reduzidos,
acompanhados de redução de citocinas Th2 no homogeneizado do intestino e soro
quando comparado aos camundongos WT e MHC II-/-. Além disso, os níveis de IgM,
IGA, IgE, IgG total e IgG1 Strongyloides específicos no soro dos camundongos
MHC II -/- reduziram significativamente, enquanto que discreto aumento nos níveis de
IgG2a pode ser observado em comparação aos camundongos WT e MHC I-/-.
Entretanto, estes resultados demonstraram que a expressão das moléculas de MHC II
mas não as de MHC classe I são essenciais para um controle efetivo da infecção por
Strongyloides, podendo explicar os possíveis mecanismos envolvidos na evasão do
parasito da resposta imune do hospedeiro desencadeando assim nas formas
potencialmente fatais da estrongiloidíase e disseminação para outros órgãos,
principalmente em indivíduos imunossuprimidos.
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