Propagation of Passiflora setacea DC. is extremely difficult, therefore tissue culture techniques become a viable alternative. The objective of this study was to evaluate the in vitro germination and determine the best culture medium for micropropagation. This work was carried out in two stages; in the first, seeds were placed in % MS culture medium and 30 g L-1 of sucrose, distributed in tubes and supplemented with different AG3 concentrations. The pH of culture medium was adjusted for 5.8 before adding 6.0 mg L-1 of agar. After seed inoculation, the cultures were kept in a growth room under 35 µmol.m-2.s-1, 26±1ºC and photoperiod of 16 hours. Just after germination, the seedlings were transferred to tubes containing % MS, constituting a second experiment, in order to test culture media with different sucrose concentrations. The experiments were arranged in a complete randomized design, in a 3x3 factorial, with four repetitions and 15 seeds/plot (first experiment) and a 4x4 factorial, with four repetitions and 3 plants/plot (second experiment). The best results for micropropagation were obtanied in MSM medium with 28.51 and 28.74 g L-1 of sucrose. The highest germination speed index was obtained with 20 mg L-1 of AG3 combined with seed tip scarification.Em função da dificuldade de propagação de Passiflora setacea DC., técnicas de cultura de tecidos tornam-se alternativas viáveis. Objetivou-se estudar a germinação in vitro e determinar o melhor meio de cultivo na sua micropropagação. O presente trabalho constou de duas etapas, na primeira as sementes (sem escarificação, escarificadas na extremidade ou na parte mediana) na foram colocadas em % MS e 30 g L-1 de sacarose, distribuído em tubos de ensaio e suplementado com zero, 20 ou 40 mg L-1 de GA3. O pH do meio foi ajustado para 5,8 antes da adição de 6,0 mg L-1 de ágar. Após a inoculação das sementes nos meios de cultura, elas foram mantidas em sala de crescimento com luminosidade de 35 µmol.m-2.s-1, temperatura de 26 ± 1ºC e fotoperíodo de 16 horas. Assim que germinaram, as plântulas foram transferidas para tubos contendo meio MS, onde constituíram um segundo experimento, a fim de se testarem meios combinados com concentrações de sacarose. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3 x 3, quatro repetições e 15 sementes por parcela no primeiro experimento e 4 x 4, com quatro repetições e 3 plantas por parcela no segundo experimento. Melhores resultados na micropropagação foram obtidos em meio de cultivo MSM, associado a 28,51 e 28,74 g L-1 de sacarose. Maior índice de velocidade de germinação foi verificado com uso de 20 mg L-1 de GA3, associado à escarificação na ponta da semente.