A endostatina (ES) ?? uma prote??na inibidora da angiog??nese, com a????o espec??fica sobre c??lulas endoteliais em prolifera????o, utilizada para tratamento de tumores s??lidos. No entanto, o elevado efeito antitumoral da ES observado em animais n??o ?? reproduzido em humanos. Com o intuito de potencializar a efic??cia terap??utica da ES, produzimos duas prote??nas h??bridas com dois dom??nios funcionais. O primeiro dom??nio ?? a ES, que apresenta especificidade por c??lulas endoteliais ativadas, dirigindo estas prote??nas de fus??o ??s c??lulas endoteliais em prolifera????o, promovendo sua internaliza????o e seu efeito inibit??rio. Como segundo dom??nio funcional utilizamos os dom??nios BH3 pr??apopt??ticos de duas prote??nas BH3-only com o objetivo de promover a libera????o de citocromo C e desencadear o processo de apoptose, aumentando a a????o antiangiog??nica da ES. Neste trabalho, foram desenhadas duas prote??nas de fus??o que cont??m o dom??nio BH3 das potentes prote??nas pr?? apopt??ticas PUMA e BIM (ES-PUMA e ES-BIM), que deveriam apresentar efeito antiangiog??nico potencializado em rela????o ?? ES selvagem. A inser????o dos fragmentos de DNA codificantes para os dom??nios BH3 de PUMA e BIM no vetor contendo o gene da ES (pET-ES) foram realizadas por mutag??nese s??tiodirigida. Estas prote??nas de fus??o recombinantes foram expressas como corpos de inclus??o em E.coli, renaturadas utilizando processo que utiliza alta press??o e purificadas em resina de afinidade por heparina. O tratamento de c??lulas endoteliais com as prote??nas ES-PUMA e ES-BIM n??o levou ?? queda de viabilidade em ensaio de MTS ou de apoptose avaliado por citometria de fluxo, em compara????o com os resultados obtidos pelo tratamento com ES.Disserta????o (Mestrado em Tecnologia Nuclear)IPEN/DInstituto de Pesquisas Energ??ticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP