Tese
Caracteriza????o bioqu??mica e farmacol??gica da crotamina irradiada por raios gama de Co-60
Biochemical and pharmacological characterization of irradiated crotamine by gamma rays Co60
Registro en:
10.11606/T.85.2014.tde-17032015-150657
Autor
OLIVEIRA, KARINA C. de
Resumen
A produ????o de soro no Brasil, ??nico tratamento eficaz nos casos de acidentes of??dicos, utiliza equinos que apesar do grande porte, apresentam diminui????o da longevidade quando comparado com os cavalos n??o imunizados. A radia????o ionizante tem se mostrado como excelente ferramenta na diminui????o da toxicidade de venenos e toxinas isoladas, al??m de promover a obten????o de melhores imun??genos para a produ????o de soro. Sabe-se, contudo, que os efeitos da radia????o ionizante em materiais prot??icos caracterizam-se por diversas altera????es qu??micas, como fragmenta????o, cross-linking, agrega????o e oxida????o devido aos produtos gerados pela radi??lise da ??gua. Por??m, a a????o da radia????o gama em toxinas ainda n??o est?? totalmente esclarecida do ponto de vista estrutural e farmacol??gico, fato que impede a aplica????o de tal metodologia no processo de produ????o do soro. Assim, foi proposto nesse trabalho a caracteriza????o da crotamina, uma das principais prote??nas do veneno da esp??cie Crotalus durissus terrificus, irradiada com raios gama de 60Co. Ap??s o isolamento da toxina por t??cnicas cromatogr??ficas e a realiza????o de testes para comprovar a obten????o da crotamina pura, a toxina, nos estados nativo e irradiado, foi submetida ??s an??lises estruturais de Fluoresc??ncia e Dicro??smo Circular. Testes utilizando altas press??es hidrost??ticas tamb??m foram realizados com o intuito de verificar se as altera????es conformacionais causadas pela radia????o sofreriam modifica????es sob altas press??es. Do ponto de vista farmacol??gico, testes de contra????o muscular foram realizados com o objetivo de delimitar a a????o da crotamina em musculatura lisa, bem como a mudan??a na a????o da toxina frente ??s altera????es estruturais ocasionadas. As an??lises de Fluoresc??ncia e Dicro??smo Circular mostraram que h?? mudan??as na conforma????o da crotamina quando submetida ?? radia????o gama e que tais altera????es possivelmente ocorrem na estrutura terci??ria e secund??ria da prote??na. O observado nos testes farmacol??gicos mostraram que a crotamina irradiada foi menos eficaz na diminui????o da contra????o muscular do ducto deferente de ratos em compara????o com a crotamina nativa. Al??m disso, o comportamento da toxina irradiada na contra????o t??nica, modulada por noradrenalina, foi distinto daquele observado para a toxina nativa. Tese (Doutorado em Tecnologia Nuclear) IPEN/T Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP