Este trabalho descreve a prepara????o, caracteriza????o e certifica????o de um conjunto de materiais de refer??ncia isot??picos de ur??nio na faixa de 0,5 a 20,0 % de 235U em massa. Os principais conceitos da metrologia em medi????es qu??micas foram aplicados para que as propriedades certificadas nos materiais pudessem ser rastre??veis diretamente ao Sistema Internacional de Unidades (SI). Em conseq????ncia desta abordagem, estes materiais poder??o ser utilizados na calibra????o de instrumentos de medi????o, avalia????o da incerteza de medi????o, valida????o de m??todos anal??ticos, avalia????o da performance de analistas, rotinas de controle de qualidade e em programas de intercompara????o de resultados de medi????o. As mais avan??adas t??cnicas e m??todos de espectrometria de massas, a saber, espectrometria de massas com fonte de g??s (GSMS), espectrometria de massas por termoionizac??o (TIMS) e espectrometria de massas com fonte de plasma induzido (ICPMS) foram investigadas para identificar quais s??o os componentes dominantes na incerteza e quantificar a sua contribui????o no valor final da incerteza de medi????o da raz??o isot??pica. Os resultados obtidos foram comparados entre si, para verificar quais t??cnicas e m??todos est??o associados aos menores valores de incerteza de medi????o. A raz??o isot??pica n(235U)/n(238U) nos materiais produzidos foi certificada com incertezas de medi????o expandidas na faixa de 0,02 a 0,10 % e as raz??es n(234U)/n(238U) e n(236U)/n(238U), com incertezas na faixa de 0,03 a 2,20 %. Estes valores atendem plenamente aos requisitos da caracteriza????o isot??pica do combust??vel nuclear, bem como aos requisitos das an??lises de amostras ambientais para fins de salvaguardas nucleares.Tese (Doutoramento)IPEN/TInstituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP