Disserta????o
Efeitos da radiacao gama na imunogenicidade das ribonucleoproteinas (RNPs) do virus da raiva e purificacao de anticorpos anti-RNPs para diagnostico
Effects of gamma radiation immunogenicity of ribonucleoprotein (RNPS) of rabies virus and purification of anti-RNPs antibodies for diagnosis
Registro en:
10.11606/D.85.2010.tde-02082011-141456
Autor
COSTA, ANA E.B. da
Resumen
A Organiza????o Mundial da Sa??de recomenda o teste de Imunofluoresc??ncia Direta (IFD) para a realiza????o do Diagn??stico Laboratorial e Avalia????o Sorol??gica da raiva. Como reveladores deste teste, s??o utilizados conjugados fluorescentes antirribonucleoprote??nas (RNPs) do v??rus da raiva, produzidos a partir de anticorpos anti-RNPs obtidos da purifica????o de soros hiperimunes de animais imunizados com RNPs purificadas. Os objetivos deste estudo foram: avaliar os efeitos da radia????o gama na imunogenicidade das RNPs e comparar dois m??todos cromatogr??ficos de purifica????o de imunoglobulinas anti-RNPs. Os soros de animais imunizados com RNPs irradiadas e n??o irradiadas foram avaliados nos testes de Imunfluoresc??ncia Indireta e Ensaio Imunoenzim??tico. A partir dos resultados obtidos pode-se concluir que os animais imunizados com RNPs irradiadas necessitam de um menor n??mero de doses para uma resposta imunol??gica com alto t??tulo de anticorpos. Por meio da IFD verificou-se que o conjugado produzido com anticorpos anti-RNPs irradiadas apresentou especificidade semelhante a do conjugado produzido a partir de anticorpos anti-RNPs n??o irradiadas, mas com melhor defini????o das inclus??es caracter??sticas do v??rus. Os processos de purifica????o de anticorpos por cromatografia de troca i??nica e cromatografia de afinidade foram avaliados utilizando-se os testes de Bradford e eletroforese (SDS-PAGE). Pelos resultados obtidos pode-se concluir que, neste estudo, o processo de purifica????o que utilizou a cromatografia de afinidade foi o m??todo que apresentou melhor rendimento, menor tempo de execu????o e obten????o de anticorpos com maior grau de pureza. Dissertacao (Mestrado) IPEN/D Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP