Artículo de revista
Hydribization screening of very short PCR products for paleoepidemiological studies of Chagas' disease
Cribado de hibridación de productos PCR muy cortos para estudios paleoepidemiológicos de la enfermedad de Chagas
Registro en:
0736-6205
1940-9818
10.2144/01301st07
392GW
11196299
WOS:000166404200015
Autor
Madden, M
Salo, WL
Streitz, J
Aufderheide, AC
Fornaciari, G
Jaramillo, C
Vallejo, GA
Yockteng, R
Arriaza, B
Cardenas-Arroyo, F
Guhl, F
Institución
Resumen
Single strands of very short PCR products can be covalently immobilized to a slide and then easily detected by probe hyhridization. In this work, the PCR product was a 70-nucleotide segment of ancient DNA, representing a portion of repeat Trycircle, DNA from the kinetoplast of Trypanosoma cruzi, the infectious agent of Chagas' disease (American Trypanosomiasis). The target segment was initially established to be present in soft tissue samples taken from four naturally mummified Andean bodies using PCR followed by cloning and sequencing. Hybridization screening of the covalently immobilized PCR products posirivelv identified products from 25 of 27 specimens of different tissues from these four,mummies. The method appears to be ideal for the purpose of screening a large number of specimens when the target PCR product is very short. Las hebras simples de productos de PCR muy cortos pueden inmovilizarse covalentemente en un portaobjetos y luego detectarse fácilmente mediante la hibridación de la sonda. En este trabajo, el producto de PCR fue un segmento de 70 nucleótidos de ADN antiguo, que representa una porción de Trycircle repetido, ADN del cinetoplasto de Trypanosoma cruzi, el agente infeccioso de la enfermedad de Chagas (tripanosomiasis americana). Inicialmente, se estableció que el segmento objetivo estaba presente en muestras de tejido blando tomadas de cuatro cuerpos andinos momificados naturalmente mediante PCR seguido de clonación y secuenciación. La selección de hibridación de los productos de PCR inmovilizados covalentemente identificó productos de 25 de 27 especímenes de diferentes tejidos de estas cuatro momias. El método parece ser ideal para el cribado de un gran número de muestras cuando el producto de PCR objetivo es muy corto.